2009 Fiscal Year Annual Research Report
界面活性剤ベシクルを用いた悪性骨・軟部腫瘍の新規治療法の開発
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21591917
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| Research Institution | Ehime University |
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Principal Investigator |
坂山 憲史 Ehime University, 医学部附属病院, 講師 (00284399)
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| Keywords | 非イオン性界面活性剤 / レクチン / 骨肉腫 / Drug Delivery System / 糖鎖 / リポソーム / ベシクル / アポトーシス |
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| Research Abstract |
目的 本研究は、海藻由来レクチンであるEucheuma serra agglutinin (ESA)と腫瘍細胞表面の糖鎖の特異的結合を利用し、Drug Delivery System (DDS)における悪性骨・軟部腫瘍治療法の臨床応用を企図した開発を行うものである。すなわちESAをDDSの薬物運搬体である非イオン性界面活性剤(Span80)ベシクル上に固定化する腫瘍標的リガンドとして利用し、化学療法剤(イフォマイド)を内包させて、ESAのヒト骨肉腫細胞株に対する特異結合性、抗癌活性の有無、アポトーシなどについて検討した。さらに、臨床応用を考慮して、この投与系の安全性を検証するため、ESAベシクル投与による毒姓・副作用の詳細な解析を行うことも目的とした。
結果 in vitroにおいて、FITCで蛍光ラベルしたESAを用いて、酵素によるOST細胞表面の糖鎖切断の有無によるESAのOST細胞への特異結合性の変化を、FACS解析、および蛍光顕微鏡観察により検討し、ESAがOST細胞膜上の糖鎖を認識して結合していることを明らかにした。さらに、FITC内包ESAベシクルを投与して、経時的に観察し、膜融合によってベシクル内のFITCが骨肉腫細胞の細胞質に移行することを明らかにした。以上の結果をふまえ、in vivo実験として、抗癌剤イホマイド、フリーのESA、イホマイド内包ESA固定化ベシクルなどを、それぞれマウス頭部にOSTを移植した担癌ヌードマウスに、眼窩静脈より投与して、腫瘍体積変化を測定し、抗癌活性を検討した。その結果、イホマイド内包ESA固定化ベシクルが最もその腫瘍を抑制する結果となった。さらに、治療モデルマウスの全臓器を検索し、ESAベシクルの安全性を検証した。
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