2009 Fiscal Year Annual Research Report
ADAMTS13の血液流動下における活性発現と抗炎症作用
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21592313
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| Research Institution | Nara Medical University |
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Principal Investigator |
西尾 健治 Nara Medical University, 医学部, 准教授 (60254489)
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| Keywords | ADAMTS13 / von Willebrand factor / MCAO |
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| Research Abstract |
ADAMTS13のVWF機能抑制による血小板粘着抑制(粘着は一般の抗血小板薬では抑制されない)は動脈血栓形成増大抑制のみならず、また新たな抗炎症薬として敗血症治療法や多臓器不全抑制療法を誘導する可能性があると考えている。そこでADADAMTS13というVWF切断酵素の抗炎症性を検証するため、まずはADAMTS13の詳細な血流下での機能発現機構を明らかにするため、本年度は各種VWFフラグメントを固相化して、それらを基質として発現される流動血液下ADAMTS13活性測定を試みた。まずはAドメインの各種WFフラグメント(両端にtagをつける)をバキュロウィルスシステムで作成し、基質としてグラス上に固相化し、フローチェンバーで全血を流し新たなADAMTS13活性測定系(ADAMTS13活性によりVWFが切断されることによるtagへの反応性の減少を観察するELISA法)を確立した。しかしながら、グラス上に固相化した、truncated VWFフラグメントに対するADAMTS13の活性は測定されず、血小板GPIbとVWFA1ドメインのみの結合ではADAMTS13によるVF切断惹起されないことが示唆された。そこで、GPIbとVWFA1ドメインの結合がより強固である場合は血小板によりVWFが伸展されて、ADAMTS13の活性が認められるかどうかを明らかにするために、血小板型フォンウィルブランド病の血小板GPIb蛋白を昆虫細胞を用い作成中である。
またマウス中大脳動脈閉そくモデルを用いて脳虚血再灌流障害に対するADAMTS13の抑制効果を検証した。虚血と同時にリコンビナントADAMTS13を注入し、生理食塩水注入群と比較したが、4時間虚血後の脳梗塞の範囲はADAMTS13投与により明らかに抑制された。ADAMTS13は血栓抑制のみならず、抗炎症作用も有することが示唆された。今後はADAMTS13の注入時期による効果の差や、長期予後を観察していきたい。
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