2009 Fiscal Year Annual Research Report
歯周病原性細菌線毛のアミロイド形成とバイオフィルム形成との関連性
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21592343
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| Research Institution | Tokyo Dental College |
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Principal Investigator |
君塚 隆太 Tokyo Dental College, 歯学部, 講師 (90287178)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
加藤 哲男 東京歯科大学, 歯学部, 准教授 (00159253)
石原 和幸 東京歯科大学, 歯学部, 教授 (00212910)
稲垣 覚 東京歯科大学, 歯学部, 助教 (20385165)
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| Keywords | 歯周病原性菌 / アミロイド |
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| Research Abstract |
歯周病原性Aggregatibacter actinomycetemcomitansは慢性歯周炎や侵襲性歯周炎の原因菌であり、心内膜炎や髄膜炎からも分離され全身疾患と関連も示されている。本菌の新鮮分離株は血液平板培地上でrough型の強固な付着性のコロニーを形成し発育する。細菌産生アミロイド線維は、大腸菌やサルモネラ菌で報告されており、共凝集、バイオフィルム形成などに深く関与している。歯周病原性細菌がアミロイド様物質を産生するか否かについては不明であり、本年度は歯周病原性A.actinomycetemcomitansのアミロイド様物質産生の有無について解析した。Rough型コロニー形成株AKRをyeast extract添加Trypticase soy brothで2日間、5%CO_2下で培養した。rough型形成株は管壁に付着し発育するため、AKRは管壁より剥離した菌体をPBSに懸濁した。アミロイド様物質の有無は蛍光色素Thioflavin T(ThT)と菌体懸濁液を混合し、直後に蛍光強度を分光蛍光光度計より測定することで判定した(励起波長:450nm、蛍光波長:486nm)。AKR菌体懸濁液のThT蛍光測定により、450nmをピークとする蛍光を検出できた。AKRの菌体を加熱およびプロテアーゼ処理しても、蛍光強度に影響は認められなかったことから、本菌のアミロイド様物質も大腸菌などのアミロイドと同様の性質をもっていることが示された。以上のことからA.actinomycetemcomitans rough型集落形成株菌体には、アミロイド様物質が存在し、本菌の付着やバイオフィルム形成などの歯周病原性に関与していると考えられた。現在本成分の精製を行っている。
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