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2009 Fiscal Year Annual Research Report

コラーゲン分解性プロテアーゼによる歯肉増殖症,瘢痕治療法の確立

Research Project

Project/Area Number 21592367
Research InstitutionNagasaki University

Principal Investigator

根本 孝幸  Nagasaki University, 医歯薬学総合研究科, 教授 (90164665)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 根本 優子  長崎大学, 医歯薬学総合研究科, 准教授 (10164667)
小野 俊雄  長崎大学, 医歯薬学総合研究科, 助教 (80050607)
馬場 友己  長崎大学, 医歯薬学総合研究科, 助教 (60189727)
小早川 健  長崎大学, 医歯薬学総合研究科, 教務職員 (10153587)
Keywordsコラーゲン / グルタミン酸特異的プロテアーゼ / 黄色ブドウ球菌 / コアグラーゼ ポジティブ / プロセシング
Research Abstract

ブドウ球菌プロテアーゼの大腸菌発現系の確立 コラーゲン分解能を持つ黄色ブドう球菌プロテアーゼのうち,ゲルタミン酸特異的プロテアーゼ(GluV8)を大腸菌で発現する系を確立した.黄色ブドウ球菌にはさらに最低10種類のプロテアーゼが発現じていることが知られている.例えばexofoliative toxin(ET)-A~Dは結合組織タンパク質デスモグレインを特異的に分解して新生児や幼児にとびひを起こすことが知られている.そこでブドウ球菌の発現するET-Aの大腸菌発現系も確立した.また黄色ブドウ球菌にはセリンプロテアーゼファミリー(Spl)A~Fに属するSplオペロンが存在する.このオペロンのコードするSplA~Fまでのは大腸菌発現系を確立した.しかしながらSpICを除く5種類のSplファミリープロテアーゼはアフィニティークロマトグラフィーゲルに公庫に結合してしまい,溶出しない.現在その溶出条件を検討中である.
黄色ブドウ球菌の強い感染性とその発現プロテアーゼに何らかの相関がある可能性があるので,類縁菌であるStaphylococcus capraeおよびS.cohniiのGuV8ファミリープロテアーゼ遺伝子もクローニングした.
活性型プロテアーゼへのプロセシング発現した黄色ブドウ球菌プロテアーゼはプロテアーゼフォームでありまだ活性を持たない.そこで各種プロテアーゼでプロ配列を除去することでその活性化を図った.その結果,GluV8ファミリープロテアーゼは,サーモライシンによって効率的に活性化することができた.一方ETA,SplA~Fはこれまでのところin vitroでの活性化には至っていない.今後の検討課題である.
グルタミン酸特異的プロテアーゼのコラーゲン分解活性とコラーゲンの構造相関GluV8 I型コラーゲンを分解することでコラーゲンに存在するGluに選択制がアルかどうかを検討中である.

  • Research Products

    (6 results)

All 2010 2009

All Journal Article (5 results) (of which Peer Reviewed: 5 results) Presentation (1 results)

  • [Journal Article] RNAi-mediated down-regulation of α-actinin-4 decreases invasion potential in oral squamous cell carcinoma.2010

    • Author(s)
      Yamada, S., Yanamoto, S., Yoshida, H., Yoshitomi, I., Kawasaki, G., Mizuno A., Nemoto, T.K.
    • Journal Title

      Int J Oral Maxillofac Surg. 39(1)

      Pages: 61-67

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Overexpression of cortactin increases invasion potential in oral squamous cell carcinoma.2010

    • Author(s)
      Yamada S, Yanamoto S, Kawasaki G, Mizuno A, Nemoto TK.
    • Journal Title

      Pathol Oncol Res. (in press.)

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Determination of three amino acids that caused the alteration of proteolytic activities of staphylococcal glutamyl endopeptidases.2009

    • Author(s)
      Nemoto TK, Ono T, Shimoyama Y, Kimura S, Ohara-Nemoto Y
    • Journal Title

      Biol.Chem. 390

      Pages: 277-285

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Single nucleotide polymorphism that accompanies a missense mutation(Gln488His)impedes the dimerization of Hsp90.2009

    • Author(s)
      Kobayakawa T, Yamada S, Mizuno A, Ohara-Nemoto Y, Baba TT, Nemoto TK
    • Journal Title

      Protein J. 28

      Pages: 24-28

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Effects of fosfomycin on Shiga toxin-producing Escherichia coli : quantification of copy numbers of Shiga toxin genes and their expression levels using real-time PCR.2009

    • Author(s)
      Ichinohe N, Ohara-Nemoto Y, Nemoto TK, Kimura S, Ichinohe S.
    • Journal Title

      J.Med.Microbiol. 58

      Pages: 971-973

    • Peer Reviewed
  • [Presentation] Staphylococcus属Glu-プロテアーゼの発現と酵素活性を決定する3アミノ酸の同定2009

    • Author(s)
      根本孝幸, 小野俊雄, 根本優子
    • Organizer
      第51回歯科基礎医学学術大会
    • Place of Presentation
      第51回歯科基礎医学学術大会
    • Year and Date
      2009-09-11

URL: 

Published: 2011-06-16   Modified: 2016-04-21  

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