2009 Fiscal Year Annual Research Report
RNA-タンパク複合体の核外輸送と細胞のがん化との関連
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21592383
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| Research Institution | Hokkaido University |
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Principal Investigator |
石川 誠 Hokkaido University, 大学病院, 准教授 (10202970)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
東野 史裕 北海道大学, 大学院・歯学研究科, 准教授 (50301891)
進藤 正信 北海道大学, 大学院・歯学研究科, 教授 (20162802)
樋田 京子 北海道大学, 大学院・歯学研究科, 特任准教授 (40399952)
北村 哲也 北海道大学, 大学院・歯学研究科, 助教 (00451451)
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| Keywords | 口腔がん / ARE-mRNA / pp32 / HuR / ノックダウン / 足場非依存性増殖能 / 浸潤能 |
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| Research Abstract |
本研究の目的はARE-mRNA及びそれに結合するpp32やHuRなどのタンパクの複合体の挙動が、どのように細胞のがん化に寄与しているかを解析し、それらを制御することにより新しいがんの治療法を開発することである。
1)口腔がん細胞で発現しているARE-mRNAの核外輸送・安定化
初年度は各種がん細胞と正常細胞でのARE-mRNAの核外輸送・安定化を検討した。その結果どのがん細胞でも、正常細胞と比べるとおおむねARE-mRNAが細胞質に多く局在し、さらに安定化されていることが明らかになった。さらにがん細胞では、細胞周期に重要な働きを担う、CDK1のmRNAのAREにHuRが結合し、安定化していることも解明した。
2)RNA結合タンパクのノックダウン
次にHuRとpp32をノックダウンするために、RNAi法用のsiRNAの設計を行い、細胞にsiRNAを導入してHuRのmRNAやタンパクの減少を確認し、さらにc-fosなどのARE-mRNAの核外輸送や安定化が阻害されるかどうか検討した。さらにHuRがノックダウンされた細胞の性質、特にがんに関わる形質を様々な角度から検討した。その結果HuRノックダウンによりARE-mRNAの核外輸送・安定化が阻害され、HuRがノックダウンされたがん細胞は、足場非依存性の増殖能や、浸潤能などのがん細胞の性質を失った。以上の研究成果は、Molecular Cancer Researchに掲載が決定し、現在印刷中である。
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