日本人歯周病患者を対象とした抗菌ペプチド遺伝子の多型解析と疾患感受性の検討

2009 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 21592626
• Research Institution: The University of Tokushima
• Principal Investigator: 稲垣 裕司 The University of Tokushima, 医学部・歯学部附属病院, 助教 (50380019)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 永田 俊彦 徳島大学, 大学院・ヘルスバイオサイエンス研究部, 教授 (10127847) ; 板東 美香 徳島大学, 大学院・ヘルスバイオサイエンス研究部, 技術補佐員 (10510000)
• Keywords: 歯周病 / 抗菌ペプチド / 遺伝子多型 / カルプロテクチン / ディフェンシン / ラクトフェリン / SNPs / インベーダー法

Research Abstract

《概要》当該年度は、SNPを解析するための手段であるインベーダー法についてInvader Oligoやプローブなどの条件設定を試み、測定系の構築を行った。これにより次年度以降はルーチン作業でSNP解析が実施できる。対象遺伝子はカルプロテクチン、β-ディフェンシン、ラクトフェリンの3種類の抗菌ペプチドから、病態との関連性が高いと思われる7SNPsを選択した。そして被験者をリストアップして末梢血を採取、血液からDNAを抽出した。
《具体的内容》
(1) 徳島大学病院を受診した日本人で、侵襲性歯周炎患者、中程度以上の慢性歯周炎患者、および健常者ボランティァを被験者とし、十分な説明を行った後、患者から同意書を得た上で本研究に参加してもらった。そして被験者の口腔内診査およびエックス線撮影を行った。
(2) 被験者より末梢血約5mlを採取し、臨床検査会社(株式会社ビー・エム・エル;以下BML)に委託して血液からDNAを抽出した。当該抽出DNAはインベーダー法の分析試料として冷凍保管した(現在97名分)。
(3) カルプロテクチン、β-ディフェンシンおよびラクトフェリンの3種類の抗菌ペプチドから7SNPsを解析対象に絞った。SNPの解析方法はインベーダー法とし、前出のBMLと共に各SNPについてそれぞれのInvader Oligoやシグナルプローブを設定を試み、測定系を構築した。
次年度より、順次インベーダー法を用いてSNPの解析を行って行く予定である。