2010 Fiscal Year Annual Research Report
可視化型シュードタイプC型肝炎ウイルスの作製とその細胞侵入機構の解明
Project/Area Number |
21790443
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Research Institution | Osaka University |
Principal Investigator |
谷 英樹 大阪大学, 微生物病研究所, 特任助教 (20397706)
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Keywords | C型肝炎ウイルス(HCV) / シュードタイプウイルス / 組換えウイルス / 水疱性口内炎ウイルス / レセプター / テトラシステインタグ |
Research Abstract |
これまでC型肝炎ウイルス(HCV)の感染に関与する多くの受容体候補分子が報告されているが、その役割は十分に解明されていない。HCVの細胞侵入機構の解析は、ウイルスが宿主細胞に影響を及ぼす最初の段階としてHCVの生活環を理解する上で重要な課題であり、HCVの細胞侵入機構の解析にはこれまでシュードタイプウイルスや細胞馴化ウイルスを用いて、HCV受容体候補の探索やその相互作用の解析が行われてきた。今回、新たな視点で細胞侵入機構を解析するために、シュードタイプウイルスの蛍光標識モデルの作製を試みた。昨年度、HCVのエンベロープ蛋白質であるE2にシステインタグを付加したシュードタイプウイルスでは感染性が見られず、VSVゲノムにシステインタグ遺伝子を組み込んだウイルスを作製し、感染性が保持されていることを確認できたので、Flash試薬による蛍光ラベル化を施し、細胞への感染の可視化を試みた。様々な方法を駆使して改善を試みたが、バックグラウンドであるVSVそのものの細胞への結合を抑えることが難しくHCVのシュードタイプウイルス特異的な細胞侵入を解析するには至らなかった。そこで、このシュードタイプウイルスを引き続き用いて、HCVが細胞に感染する際に関与する分子を探索した結果、上皮成長因子受容体(EGFR)がレセプター直下で作用している可能性が示唆された。またその下流で作用出来るフォスフォリパーゼCや更に下流に位置するプロテインキナーゼCも関与しており、これらがHCVの感染により活性化されることで最終的にアクチンの脱重合が起こり、HCV受容体群が集合してくるのではないかと考えられた。ウイルス感染による一連のレセプターの局在変化などは可視化により確認できており、今後ウイルスの直接的な可視化が望まれている。
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Research Products
(8 results)
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[Journal Article] Elimination of hepatitis C virus from hepatocytes by a selective activation of therapeutic molecules.2011
Author(s)
Xiaoyu Wen, Takayuki Abe, Hiroshi Kukihara, Shuhei Taguwa, Yoshio Mori, Hideki Tani, Nobuyuki Kato, Suzuki Tetsuro, Masashi Tatsumi, Kohji Moriishi, Yoshiharu Matsuura.
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Journal Title
PLoS ONE
Volume: 6
Pages: e15967
Peer Reviewed
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[Journal Article] Establishment of an indicator cell system for hepatitis C virus.2010
Author(s)
Yoshinori Tanaka, Yoshio Mori, Hideki Tani, Takayuki Abe, Kohji Moriishi, Hirotatsu Kojima, Tetsuo Nagano, Takayoshi Okabe, Tetsuro Suzuki, Masashi Tatsumi, Yoshiharu Matsuura.
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Journal Title
Microbiology and Immunology
Volume: 54
Pages: 206-220
Peer Reviewed
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[Presentation] Intracellular delivery of serum-derived HCV.2010
Author(s)
Takasuke Fukuhara, Hideki Tani, Mai Shiokawa, Takayuki Abe, Kohji Moriishi, Akinobu Taketomi, Yoshihiko Maehara, Yoshiharu Matsuura.
Organizer
17th International Meeting on Hepatitis C Virus and Related Viruses.
Place of Presentation
Japan・Yokohama
Year and Date
20100910-20100914
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