2010 Fiscal Year Annual Research Report
スーパーオキシド産生酵素の活性調節を介する薬物有害作用発現の分子基盤の解明
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21790525
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| Research Institution | Kyoto Prefectural University of Medicine |
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Principal Investigator |
勝山 真人 京都府立医科大学, 医学研究科, 准教授 (60315934)
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| Keywords | NADPHオキシダーゼ / NOX / 活性酸素 / Sp3 / クリオキノール |
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| Research Abstract |
スーパーオキシドや過酸化水素などの活性酸素種は、生体内において感染微生物を死滅させる善玉としての作用と、脂質過酸化などにより生体にダメージを与える悪玉としての作用を持つ。さらに活性酸素種が細胞内シグナル伝達分子としてはたらくことも明らかとなっている。申請者は神経障害を引き起こすクリオキノール(キノホルム)がスーパーオキシド産生酵素NOX4/NADPHオキシダーゼの発現をmRNAレベルで抑制することを見出し、クリオキノールの細胞毒性が、NOX4/NADPHオキシダーゼの発現抑制とそれに伴うスーパーオキシドの産生低下を介して引き起こされることを明らかにした。NOX4遺伝子を用いてレポーターアッセイを行ったところ、クリオキノールによる発現抑制に関与する配列が5'非翻訳領域内に存在した。このことから、クリオキノールによるNOX4の発現抑制は、mRNAの安定性の調節により行われることが示唆された。NOX4は種々の細胞に普遍的に発現するため、その基本転写に関与する部位と関与する転写因子の解明を試みた。ヒト神経芽細胞腫と腎臓由来の細胞を用いたレポーターアッセイの結果、NOX4の基本転写には、クリオキノールによる発現抑制に関与する配列とは別の3か所のGC-boxが必須であることが判明した。ゲルシフトアッセイおよびクロマチン沈降法の結果、そのうちの2か所のGC-boxに転写因子Sp1とSp3が結合することが判明した。RNA干渉による検討の結果、NOX4の発現にはSp3が必須であることが判明した。Sp3は様々な細胞で構成的に発現する遺伝子の転写に関与することが知られており、NOX4のユビキタスな発現にも関与することが示された。
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Research Products
(1 results)
