骨芽細胞における全トランス型レチノイン酸のFGF23発現・分泌に対する検討

2009 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 21790967
• Research Institution: Tohoku University
• Principal Investigator: 箱田 明子 Tohoku University, 病院, 医員 (70509398)
• Keywords: 骨芽細胞 / レチノイン酸 / FGF23

Research Abstract

骨組織における全トランス型レチノイン酸(all-trans retinoic acid ; ATRA)とFGF23の連関について未だ報告はなく、ATRAによりFGF23が制御されることが解明されれば、FGF23により惹起される低リン血症性くる病/骨軟化症に対して、FGF23を標的とした新たな治療につながることが期待されることから、ATRAによるFGF23発現・分泌への影響およびその機序を解明するために最初に以下の実験を行った。Cambex社のヒト由来骨芽細胞(Normal Human Osteoblast Cell)と専用の培地(OGM^<TM> BulletKit)を用いてControl群と培地に各濃度のATRA(1nM,10nM,100nM,1μM)を添加した群とでヒト由来骨芽細胞を培養後、上清へのFGF23の分泌をELISA法で評価した。結果は、Control群と各濃度のATRA添加群でFGF23分泌に変化を認めなった。次にControl群と培地に各濃度のATRA(1nM,10nM,100nM,1μM)を添加した群とでヒト由来骨芽細胞を培養後、蛋白を抽出し、FGF23抗体を用いたWestern blot法によりFGF23の細胞内蛋白発現を解析した。結果は、生理的濃度のATRAにおいてFGF23タンパクの発現を認めたが、薬理学的高濃度では発現低下を認めた。今後、蛋白発現変化について再現性を確認するとともに、定量PCRを用いてFGF23 mRNAの発現を解析する。