2010 Fiscal Year Annual Research Report
卵巣癌の染色体不安定性機構解明及び不安定性誘導因子を標的とした治療法の開発
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21791557
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| Research Institution | Shimane University |
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Principal Investigator |
中山 健太郎 島根大学, 医学部, 講師 (70346401)
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| Keywords | 卵巣癌 / 分子標的 |
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| Research Abstract |
漿液性卵巣癌のDigital Karyotypingの結果、1/7(14.3%)にCh19p13.2の遺伝子増幅を認めた。The Cancer Genome Atlas(TCGA)のデータベース解析により漿液性卵巣癌の18%にCh19p13.2の遺伝子増幅がある事を明らかにした。Ch19p13.2領域ではNACC1を含む7つの遺伝子がmRNA発現と遺伝子copy数に相関を認めた(R>0.54)。我々は以前からNACC1がOncogenicな機能を有する事を報告してきたため、NACC1がDriver geneであると想定し、Dual-Color FISHでValidationした。Dual-Color FISHでは20/175(20%)にNACC1 locusの遺伝子増幅が認められた。また、NACC1遺伝子増幅は6ヶ月以内の再発と相関していた。免疫染色によるNAC1タンパク質発現とFISHによるNACC1遺伝子増幅には正の相関が認められた。NACC1のsiRNAやDominant negativeな作用をもつNACC1のN末領域のdeletion mutantを作成し、NACC1が過剰発現しているSKOV3細胞に発現させると、細胞死を引き起こす事を発見した。NACC1を強制発現させた細胞株において遺伝子レベルが低下する遺伝子群を網羅的に検索し、NACC1の下流の標的遺伝子としてGADD45GIP1を同定した。GADD45GIP1はアポトーシスを誘導し、NACC1はGADD45GIP1遺伝子の転写を抑制的に制御していると考えられた。NAC1はBEN領域を有するファミリータンパク質であるNACC2とはヘテロ二量体を形成できるが、BEN領域を有しない他のBTB領域タンパク質とはヘテロ二量体を形成できなかった。NAC1タンパク質は、コンピュータ検索により最近同定されたBEN領域を有する。試験管内結合実験により、BEN領域を介してNAC1タンパク質は直接DNAと結合することを証明した。PCRを利用したランダムオリゴDNA結合スクリーニング法により、BEN領域依存的にNAC1タンパク質に結合するDNA配列を決定した。このDNA配列はGADD45GIP1遺伝子のプロモーター領域に4カ所存在する。試験管内結合実験によりNAC1タンパク質はBEN領域を介してGADD45GIP1遺伝子のプロモーターに直接結合する事を発見した。
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[Journal Article] Frequent Mutations of Chromatin Remodeling Gene ARID1A in Ovarian Clear Cell Carcinoma.2010
Author(s)
Jones S, Wang TL Shih IM, Mao TL, Nakayama K, Roden R, Glas R, Slamon D, Diaz LA Jr, Vogelstein B, Kinzler KW, Velculescu VE, Papadopoulos N.
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Journal Title
Science
Volume: 330
Pages: 228-231
Peer Reviewed
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[Journal Article] DNA copy numbers profiles in affinity-purified ovarian clear cell carcinoma.2010
Author(s)
Kuo KT, Mao TL, Chen X, Feng Y, Nakayama K, Wang Y, Glas R, Ma MJ, Kurman RJ, Shih IeM, Wang TL
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Journal Title
Clin Cancer Res.
Volume: 16
Pages: 1997-2008
Peer Reviewed
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