2010 Fiscal Year Annual Research Report
Project/Area Number |
21792071
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Research Institution | Okayama University |
Principal Investigator |
川邉 紀章 岡山大学, 岡山大学病院, 講師 (00397879)
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Keywords | ヒト乳歯歯根膜幹細胞 / ヒト乳歯歯髄幹細胞 / Stage-specific embryonic antigen-4 |
Research Abstract |
本年度の研究では、グロボ系ガングリオシドであるstage-specific embryonic antigen (SSEA)-4が、ヒト乳歯歯根膜幹細胞およびヒト乳歯歯髄幹細胞に特異的な表面抗原マーカーであるかについて検討を行った。岡山大学病院矯正歯科における矯正治療開始患者の乳歯便宜抜去歯から、歯根膜および歯髄を採取した。採取した組織より得られた細胞を培養し、以下の実験に用いた。培養細胞および組織におけるSSEA-4の発現は蛍光免疫組織化学により評価を行った。表面抗原発現の解析、および細胞の単離はフローサイトメトリーを用いて行った。細胞の分化能は、それぞれの分化誘導培地を用いて、脂肪細胞・骨芽細胞・軟骨細胞への分化誘導を行い、評価を行った。mRNA発現はRT-PCRを用いて調べた。蛍光免疫細胞化学の結果、SSEA-4はヒト乳歯歯根膜細胞・ヒト乳歯歯髄細胞のいずれにおいても発現が認められた。フローサイトメトリーを用いた解析の結果、SSEA-4はヒト乳歯歯根膜細胞において22.66%、ヒト乳歯歯髄細胞において約21.21%の発現が認められた。SSEA-4陽性ヒト乳歯歯根膜細胞およびSSEA-4陽性ヒト乳歯歯髄細胞は、いずれも脂肪細胞・骨芽細胞・軟骨細胞への分化能を有することが示された。また、共焦点顕微鏡を用いた蛍光免疫組織化学より、ヒト乳歯歯根膜組織およびヒト乳歯歯髄組織にSSEA-4陽性細胞が存在することが確認された。
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