心筋細胞における抗アポトーシス効果:グルタレドキシンによる酸化還元制御の解析

2009 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 21890193
• Research Category: Grant-in-Aid for Young Scientists (Start-up)
• Research Institution: Nagasaki University
• Principal Investigator: 稲冨 千亜紀 Nagasaki University, 病院, 助教 (20508444)
• Keywords: 酸化ストレス / 心筋保護 / 循環器・高血圧

Research Abstract

Glyceraldehyde-3-phosphate-dehydrogenase(GAPDH)の酵素活性と酸化還元状態との関連についての解析
以前よりGAPDHの核移行がアポトーシス促進と関与することが知られている。また、GAPDHがnitricoxide(NO)によるS-nitrosylationによって核移行しアポトーシスを起こすことが知られている。
我々はラット心筋芽細胞H9c2コントロール細胞(H9c2-control)とH9c2のglutaredoxin(GRX)過剰発現細胞(H9c2-GRX)を一酸化窒素(NO)-donorであるS-nitroso-N-acetyl-DL-penicilamine(SNAP)で刺激後にMTT assay等で細胞の生存率を比較し、GRX過剰発現がNOによる細胞死からH9c2細胞を保護していることを示唆するデータを得ている。
(1)、 GAPDHの核移行抑制によるGRXの抗アポトーシス効果
H9c2-controlとH9c2-GRXにそれぞれ200μMのSNAPで刺激を与え、免疫蛍光抗体法を用いてGAPDHの細胞内局在を比較した。H9c2-controlではNOによる刺激でGAPDHが細胞質から核に移行するのに対し、H9c2-GRXではNOによる刺激でもGAPDHの分布に大きな変動がない傾向が認められた。
以上のことから、GRXの過剰発現がNO-donorの刺激によるGAPDHの核移行を抑制することで、アポトーシスの抑制に影響を与えている可能性が示唆された。