2021 Fiscal Year Annual Research Report
真核生物におけるppGppの機能解明を目指した分子プローブの開発
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21H02075
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| Research Institution | Tokyo Institute of Technology |
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Principal Investigator |
清尾 康志 東京工業大学, 生命理工学院, 教授 (20313356)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
増田 真二 東京工業大学, 生命理工学院, 准教授 (30373369)
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| Project Period (FY) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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| Keywords | グアノシンテトラリン酸 / ppGpp / 緊縮応答 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
グアノシンを出発原料として用い、2', 3'-水酸基の保護を経て2'水酸基がらビオチンリンカーを伸長したグアノシン保護体との合成とその3', 5'水酸基のビスピロリン酸化を達達成し、予定通り2'位にビオチンリンカーを有するppGpp誘導体の合成法を確立して。また、アビジン単体へのこの誘導体の固定、シロイヌナズナの細胞からのタンパク質含有抽出液の作製および、抽出液中のタンパク質の質量分析による網羅的同定法の予備検討そ実施し、ppGpp結合タンパク質を同定するための実験に必要な試料および同定法を確立した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
本年度は計画通りビオチンリンカーを有するppGpp誘導体の合成法を確立し、タンパク質同定のための試料作製と同定手法の予備検討を行い、次年度の研究実施のために必要な技術を開発することができたため。
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| Strategy for Future Research Activity |
令和３年度に合成した誘導体と確立した合成法をもとにppGpp結合タンパク質を同定するために分子プローブを合成し、タンパク質同定実験に用いる。またタンパク質同定実験としてはシロイヌナズナを材料にタンパク質含有抽出液の作製を再度行い、抽出液から分子プローブに結合したタンパク質の分子量を一次配列を解析することでppGpp結合タンパク質の同定を行う。
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