2021 Fiscal Year Annual Research Report
生細胞内メンブレンコンタクトの可視化・操作ツールの開発
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21H02078
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| Research Institution | Nagoya Institute of Technology |
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Principal Investigator |
築地 真也 名古屋工業大学, 工学(系)研究科(研究院), 教授 (40359659)
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| Project Period (FY) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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| Keywords | メンブレンコンタクト / 蛍光プローブ / 局在性リガンド / 分割型タンパク質 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究では、細胞内のメンブレンコンタクトを特異的に可視化および操作することのできる新規ケミカルバイオロジーツールを開発することを目的とする。本年度は下記の成果を達成した。
１）可視化ツール：膜と膜が近接した領域を特異的に検出することのできる分割型タンパク質レポーターの開発に取り組んだ。細胞膜ー小胞体膜（PM-ER）コンタクトを検出対象とし、分割型タンパク質フラグメントの近接再構成を利用することで、PM-ERコンタクトを特異的かつ可逆的に可視化することのできる分割型タンパク質レポーターシステムを構築することに成功した。
２）操作ツール；申請者の独自技術である局在性リガンドを活用したメンブレンコンタクト誘導ツールの開発に取り組んだ。複数の局在性リガンドとタンパク質コンストラクトを用いたアッセイを行い、PM-ERコンタクトを効率的に誘導することのできる化学遺伝学システムを構築した。本システムは、可逆的なコンタクト形成と解消を誘導できることも確認した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
上述のように、本年度は、本研究の最も重要な鍵となる、コンタクト特異的な可視化と操作のための基盤ツールをそれぞれ開発することに成功した。今後さらなる最適化が必要ではあるものの、可逆性のあるコンタクトの可視化と操作ツールはこれまでになく、コンタクトの生理機能解明につながる大事なツール開発がうまくいき始めている。
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| Strategy for Future Research Activity |
今後は本年度開発した可視化・操作ツールのさらなる最適化と、PM-ERコンタクトの生理機能の解明へ向けた実験に取り組む。
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