2022 Fiscal Year Annual Research Report
細胞膜と細胞外構造体の協調的相互作用によるTORC2シグナルの活性制御モデル
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21H02103
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| Research Institution | Kyoto University |
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Principal Investigator |
井上 善晴 京都大学, 農学研究科, 教授 (70203263)
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2021-04-01 – 2024-03-31
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| Keywords | TORC2 / 酵母 / Pkc1 / Plc1 / メチルグリオキサール |
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| Outline of Annual Research Achievements |
これまでの研究から、Cell Wall Integrity（CWI）経路の活性化はTORC2-Ypk1/2シグナルの活性化に対して抑制的に作用していること、すなわち、オーレオバシジンA（AbA）によるTORC2-Ypk1/2シグナルの活性化は、CWI経路を介して活性化されたPkc1により抑制され得ることを明らかにしてきた。そこで本年度は、TORC2シグナルによるPkc1の活性化について検討を行った。今回、tor2-ts温度感受性変異株の温度感受性をマルチコピーで抑圧することが知られているPlc1に着目して検討を行った。Plc1の欠損株はTORC2-Pkc1シグナルを活性化させるメチルグリオキサール（MG）やTORC2-Ypk1/2シグナルを活性化させるAbAに対して感受性を示した。また、plc1欠損株ではMGやAbA処理によるTORC2-Pkc1ならびにTORC2-Ypk1/2シグナルの活性化も起こらなかった。しかしながら、ホスホリパーゼ活性のないPlc1-H393A/N394A変異体では、AbAによるTORC2-Ypk1/2シグナルの活性化は起こったが、MGによるTORC2-Pkc1シグナルの活性化は起こらなかった。そこで、Pkc1のTORC2によるリン酸化部位であるS1143のリン酸化を検討したところ、plc1欠損株ではMG処理によるPkc1-S1143のリン酸化が起こらなかった。Pkc1の下流にはMpk1 MAPキナーゼ経路が存在する。MG処理によりTORC2-Pkc1経路を介してMpk1のリン酸化が起こるが、plc1欠損株ではMGによるMpk1のリン酸化が起こらなかったのに対し、熱ショックによるCWI経路を介したMpk1のリン酸化は野生株と同様に起こった。Plc1がPkc1の局在に及ぼす影響を検討した結果、plc1欠損株やPlc1-H393A/N394A変異体では芽の先端に局在するPkc1の割合が顕著に低下していた。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
tor2-ts温度感受性変異のマルチコピーサプレッサーとしてPLC1が取得された原因として、Plc1がTORC2-Pkc1やTORC2-Ypk1/2シグナルの活性化に関与すること、ならびにPlc1がPkc1のbud tipへの局在に関与するためであることを明らかにすることができた。このことは、TORC2シグナルの制御機構の解明において大きく貢献するものである。しかしながら、CWI経路を介して活性化されたPkc1が、どのようにしてAbAにより活性化されたTORC2-Ypk1/2シグナルに対して抑制的に働いているかを解明するには至らなかった。
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| Strategy for Future Research Activity |
TORC2-Ypk1/2シグナルの活性化においては、細胞膜の構造体であるeisosomeからSlm1/2が遊離し、TORC2が存在するMCT画分へと移動するモデルが提唱されている。そこで、エデルフォシンによるTORC2-Ypk1/2シグナルの阻害機構について、エデルフォシンがeisosomeの構造や形成に及ぼす影響について検討を進める。
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