2023 Fiscal Year Annual Research Report
スプライシング異常細胞を排除する「細胞の品質管理機構」の解明
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21H02423
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| Research Institution | University of Toyama |
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Principal Investigator |
甲斐田 大輔 富山大学, 学術研究部医学系, 准教授 (60415122)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
高崎 一朗 富山大学, 学術研究部工学系, 准教授 (00397176)
岩崎 信太郎 国立研究開発法人理化学研究所, 開拓研究本部, 主任研究員 (80611441)
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| Project Period (FY) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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| Keywords | スプライシング / p27 / 安定性 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
前年度までの研究から、スプライシング阻害によりCDKインヒビターp27のmRNAが安定化することが明らかとなっていた。また、その安定化にはp27 mRNAの3'UTRが関わっていることも見出していた。しかしながら、安定化に寄与する3'UTR上の配列やトランス因子などに関しては明らかになっていなかったため、これらを明らかにするために研究を行なった。mRNA上の安定化に関わる配列としてmiR-221/222の結合配列を同定した。これらの配列に変異を導入することで、p27 mRNAの安定性が顕著に上昇した。スプライシング阻害によりmiR-221/222のRNA量が減少することでp27 mRNAが安定化するのではないかと予想を立て、スプライシング阻害条件下でのmiR-221/222量を測定したところ、miR-221/222量には変化は見られなかった。また、miRNAが機能するのに必要なmiRISC複合体の構成タンパク質の量が変化するかどうかを確かめたところ、こちらにも変化は見られなかった。次に、miR-221/222がp27 mRNAに結合することを補助するタンパク質の量とリン酸化レベルを測定したところ、スプライシング阻害によりタンパク量の若干の減少とリン酸化レベルの顕著な減少が観察された。また、このタンパク質のリン酸化部位の同定も行ない、リン酸化部位に変異を導入した発現プラスミドの作成などを行なった。
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| Research Progress Status |
令和5年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
令和5年度が最終年度であるため、記入しない。
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