2022 Fiscal Year Annual Research Report
白血病単一細胞分岐鎖アミノ酸代謝特性解析のためのマイクロ分離分析法の開発
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21H02613
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| Research Institution | The University of Tokyo |
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Principal Investigator |
角田 誠 東京大学, 大学院薬学系研究科(薬学部), 准教授 (10323453)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
船津 高志 東京大学, 大学院薬学系研究科(薬学部), 教授 (00190124)
伊藤 貴浩 京都大学, 医生物学研究所, 教授 (00323452)
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| Project Period (FY) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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| Keywords | アミノ酸 / がん / クロマトグラフィー |
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| Outline of Annual Research Achievements |
研究代表者らはこれまでに、分岐鎖アミノ酸の代謝変化が白血病の悪性化に直接寄与していることを明らかにした。白血病悪性化における分岐鎖アミノ酸代謝の全体像を明らかにするためには、単一細胞レベルでの解析が必須である。そこで、本研究において、白血病単一細胞アミノ酸定量のためのマイクロ分離分析法開発を目的とする。オンチップ液体クロマトグラフィーによる高性能分離と蛍光顕微鏡による高感度検出を組み合わせ、単一細胞アミノ酸の高精度定量を可能にする。単一細胞アミノ酸定量のためのマイクロ分離分析法開発に向けて、本年度は、以下の２つの要素技術について検討した。
（１）オンチップ液体クロマトグラフィー技術は現状、保持が弱く、分析対象化合物が限定されている。アミノ酸の分離分析においては、疎水性の高いアミノ酸しか保持させることができない。そこで、極性分子の保持が強い親水性相互作用クロマトグラフィー（HILIC）を、ピラーアレイカラムの分離モードとして検討した。今年度は、親水性官能基としてアミド基を用いた。
（２）単一細胞分析において、前処理操作における希釈が問題になることが考えられる。そこで、希釈を防ぐために液滴に封入した単一細胞溶解液をそのままピラーアレイカラムに注入することを検討した。今年度は、前処理時の液滴作製条件の検討を行った。PDMS (polydimethylsiloxane)製マイクロ流体チップを用いて、W/O(Water in Oil)微小液滴を作る方法を確立した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
液体クロマトグラフィーチップの製造が遅れたため。
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| Strategy for Future Research Activity |
引き続き、HILICモードの液体クロマトグラフィーチップを用いた生体分子の保持検討を行う。また、試料導入部としての、液滴注入についても研究を進める予定である。
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