2022 Fiscal Year Annual Research Report
Nobel RNA modification in bacteria and its pathophysiological significance
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21H02731
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| Research Institution | Kumamoto University |
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Principal Investigator |
富澤 一仁 熊本大学, 大学院生命科学研究部(医), 教授 (40274287)
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| Project Period (FY) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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| Keywords | 修飾ヌクレオシド / 細菌 / RNA修飾 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究では、1. 高次構造を有さないヌクレオシドを修飾する酵素は実在するのか？その酵素は何か？ 2. 細菌における新規ヌクレオシドの修飾の意義は何か？ 3 新規修飾ヌクレオシドが生理活性物質として機能するか？もし機能するなら受容体は何か？という問いに答える研究を実施している。
今年度は、昨年度同定したm3A受容体の組織発現ならびに細胞内発現を定量PCR法ならびにウエスタンブロット法で同定した。その結果、胸腺やマクロファージなどの免疫組織や細胞、さらに腎臓に多く分布していることが分かった。腎臓での分布について、詳細な解析を行った結果、尿細管に多く分布していることが明らかになった。そこで、m3A受容体を多く発現しているヒト単球由来M1およびM2マクロファージを培養し、1 nMから1 microMの濃度でm3Aで処理した。処理1時間後にRNAを回収し、 インターロイキンの発現についてqPCR法で検討した。その結果、m3Aは濃度依存的にインターロイキンの発現を促進することが明らかになった。
さらにm3Aが細胞増殖やアポトーシスならびに細胞移動などには影響を及ぼすかWST-1アッセイ、TUNEL染色ならびに細胞遊走アッセイで検討した。その結果、m3Aは、細胞増殖やアポトーシスならびに細胞移動には影響を及ぼさないことが明らかになった。
以上の結果より、m3Aはm3A受容体を介してマクロファージの免疫機能を促進することが明らかになった。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
計画していた研究を遂行することができたため。
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| Strategy for Future Research Activity |
申請書に記載している研究計画を遂行する。
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