2023 Fiscal Year Annual Research Report

Analysis of a multifunctional Wnt/c-Myc target lncRNA in tumorigenesis

Research Project

Project/Area Number	21H02771
Research Institution	Kansai Medical University
Principal Investigator	川崎善博関西医科大学, 附属光免疫医学研究所, 准教授 (10376642)
Project Period (FY)	2021-04-01 – 2024-03-31
Keywords	Wnt / c-Myc / lncRNA
Outline of Annual Research Achievements	大多数の大腸癌ではWntシグナル経路の異常亢進が起こっており、癌遺伝子c-Mycが細胞の癌化に関わる最も重要なWntシグナル標的因子の一つであると考えられている。これまでの研究によって、我々はWnt/c-Myc経路の直接の標的因子として新規lncRNA（long non-coding RNA）：MYUを見出し、MYUが大腸がん細胞の増殖に必須であることを明らかにしてきた。本研究では、これまでの研究内容をさらに発展させ、Wnt/c-Myc/MYUカスケードが関わる大腸癌発症機構の理解を深めることで大腸癌の新しい分子標的治療法開発の為の足掛かりを得ることを目的とした。これまでの研究から、翻訳されないRNAとして分類されていたMYUからはペプチドが発現している可能性を示唆するデータが得られていた。そこで、内在性MYUペプチドの存在や機能を明らかにするために、MYUペプチドに対する抗体の作成を試みた。前年度に作製していたGST-MYUペプチド（GST融合MYUペプチド）を抗原とした新たなウサギ抗血清からアフィニティーカラムを用いて抗体を精製し、ウエスタンブロット法および細胞染色法による抗体の特性評価を行ったところ、MYUペプチドに対する特異性の高い抗体は得られていないことが分かった。現在、ラットモノクローナル抗体（mAb）の作成に精通する専門家の協力を得て、抗MYUペプチドmAbの作成を進めている。さらに、HA-MYU（HAタグを付加したMYUペプチド）を含む複合体のMS解析により、MYUペプチド結合候補タンパク質を６種類得ることに成功した（共同研究）。本知見はMYUペプチドの機能解析を進めるうえで新たな手掛かりになると考えられた。
Research Progress Status	令和5年度が最終年度であるため、記入しない。
Strategy for Future Research Activity	令和5年度が最終年度であるため、記入しない。