2021 Fiscal Year Annual Research Report
上皮、間葉系肝癌幹細胞による間質細胞リプログラミングの解明とその診断治療への応用
| Project/Area Number |
21H02900
|
|---|
| Research Institution | Kanazawa University |
|---|
Principal Investigator |
山下 太郎 金沢大学, 附属病院, 准教授 (90377432)
|
|---|
| Project Period (FY) |
2021-04-01 – 2024-03-31
|
| Keywords | 癌幹細胞 |
|---|
| Outline of Annual Research Achievements |
癌は様々な遺伝子異常が集積した癌細胞と、血管新生、線維化、炎症などを局所に生じせしめる異常な間質細胞からなり、個体により異なる個性的な細胞社会を形成し進化していく。これまでに申請者は肝癌の発生維持、細胞社会形成に必須の集団である癌幹細胞について、悪性形質や治療抵抗性、予後に関わること、肝癌幹細胞には上皮系、間葉系の2種類が存在し、それぞれ細胞周期シグナル、上皮間葉転換シグナル活性が異なることを報告してきた。一方癌幹細胞は浸潤先端で間質細胞に接して存在し、癌幹細胞によりリプログラミングを受けた間質細胞では血管新生や線維化、免疫チェックポイントなど、癌治療における重要な標的分子が発現する。本研究は代表的な難治癌である肝細胞癌に着目し、上皮系、間葉系の異なる癌幹細胞が間質細胞のリプログラミングに与える影響を１細胞レベルで網羅的に解明し、間質細胞を標的とした難治性肝癌に対する新たな診断治療標的分子の導出を目指す。本年度は上皮系、間葉系肝癌幹細胞が間質細胞、特に線維芽細胞に与える影響について、肝癌培養細胞株および線維芽細胞を用いて２D、３D培養（NanoHep培養デバイス）を用いて解析した。得られたデータはSeqGeqソフトウェアを用いてtSNE、heatmap解析を行い、経時的に発現変動が認められる遺伝子群を上皮系癌幹細胞（EpCAM+）、間葉系癌幹細胞（CD90+）、線維芽細胞（PDGFR+）に分類して検討した。上皮系、間葉系肝癌幹細胞は線維芽細胞に対し全く異なる遺伝子蛋白発現誘導を行うこと、逆に線維芽細胞も上皮系、間葉系肝癌幹細胞に異なる遺伝子蛋白発現誘導を行うことが明らかになった。
|
| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
本研究では、１）３D培養システムを用いた上皮系、間葉系肝癌幹細胞および間質細胞の共培養、２）上皮系、間葉系肝癌幹細胞および間質細胞の経時的1細胞トランスクリプト―ム解析、を初年度に行うこととしており、おおむね予定通りに進捗しているといえる。
|
| Strategy for Future Research Activity |
今後は、３）上皮系、間葉系肝癌幹細胞および間質細胞の転写因子解析、４）上皮系、間葉系肝癌幹細胞および間質細胞の共培養サンプルを用いた、転写因子結合領域のDNAメチル化アレイ解析、５）超解像顕微鏡による癌間質細胞リプログラミング過程の分子イベントイメージング、６）マウス皮下移植モデルを用いた、標的分子が肝細胞癌の悪性度に与える影響の検討、７）臨床検体を用いた標的分子と肝細胞癌悪性度との関連の検討、を本年度の解析データをもとに予定通り推進していく。
|
-
-
[Journal Article] Serum Laminin γ2 Monomer as a Diagnostic and Predictive Biomarker for Hepatocellular Carcinoma.2021
Author(s)
Yamashita T, Koshikawa N, Shimakami T, Terashima T, Nakagawa M, Nio K, Horii R, Iida N, Kawaguchi K, Arai K, Sakai Y, Yamashita T, Mizukoshi E, Honda M, Kitao A, Kobayashi S, Takahara S, Imai Y, Yoshimura K, Murayama T, Nakamoto Y, Yoshida E, Yoshimura T, Seiki M, Kaneko S.
-
Journal Title
Hepatology
Volume: 74
Pages: 760-775
DOI
Peer Reviewed
-
-
-
