2023 Fiscal Year Annual Research Report
動的ゴーストイメージング技術を用いた高骨形成細胞集団の分取と機能的再生骨の実現
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21H03136
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| Research Institution | The University of Tokyo |
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Principal Investigator |
星 和人 東京大学, 医学部附属病院, 教授 (30344451)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
浅輪 幸世 東京大学, 医学部附属病院, 特任講師 (10769912)
疋田 温彦 東京大学, 医学部附属病院, 特任教授 (60443397)
西條 英人 東京大学, 医学部附属病院, 准教授 (80372390)
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| Project Period (FY) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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| Keywords | 骨再生 / 細胞選択 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
・採取直後のマウス骨髄細胞の骨芽細胞分化能について、前年度までの検討においては、赤血球破砕したもので骨芽細胞分化能が高く、Ficollを用いた密度勾配遠心で単核球を分取したもので低いという結果であった。これは、骨芽細胞前駆細胞の基となる間葉系幹細胞はFicollによる単核球分取により濃縮されるという予想に反するものであった。この理由を検索するため、細胞をCD34、CD73、CD51に対する蛍光標識抗体でラベルし、CD34-CD73＋CD51＋細胞群の割合についてフローサイトメトリーでの検証を行ったところ、Ficoll群では赤血球破砕群に比べてこの細胞群の割合が減少していた。そのため、骨髄細胞を濃縮して骨形成の促進を図るためには、Ficollを用いた密度勾配遠心におけるこの細胞群の喪失を防ぐ方策が重要であると考えられた。
・骨髄中に含まれる骨形成能の高い細胞集団を同定する別の方法として、細胞分裂速度の違いによる細胞の分取法を検討した。間葉系幹細胞を蛍光試薬CFSEを用いて標識し、一定期間培養したのちに、Flow cytometryを用いた解析を行った。その結果、細胞分裂速度の違いにより細胞当たりの試薬の希釈の程度が異なることで、蛍光強度を示すヒストグラムが幅広く分布することを確認し、細胞を分取してそれぞれの骨形成能の評価を開始した。
・また、ハイドロゲルについては、I型コラーゲンとII型コラーゲンの混和物について検討を進し、その混合割合を変えた際の細胞増殖能や細胞生存率などについて解析を行った。
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| Research Progress Status |
令和5年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
令和5年度が最終年度であるため、記入しない。
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