Exploring novel glucosidase for glucoside synthesis and the characterization.

2023 Fiscal Year Final Research Report

• Project/Area Number: 21K05374
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• Allocation Type: Multi-year Fund
• Section: 一般
• Review Section: Basic Section 38020:Applied microbiology-related
• Research Institution: Oyama National College of Technology
• Principal Investigator: UEDA Makoto 小山工業高等専門学校, 物質工学科, 教授 (10615751)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 竹内 道樹 京都大学, 農学研究科, 特定助教 (40766193) ; 原 良太郎 京都大学, 農学研究科, 特定准教授 (70553535)
• Project Period (FY): 2021-04-01 – 2024-03-31
• Keywords: 配糖体 / β-グルコシド結合 / β-グルコシダーゼ

Outline of Final Research Achievements

We investigated of screening of microorganisms that produce β-glycosides by transglycosylation in soil and in the laboratory. Washed cells of Agrobacterium sp. No.201, a bacterium isolated from soil, accumulated phenethyl alcohol-β-D-glucopyranoside with a molar yield of 15.2% under reaction conditions of 7 g/L phenethyl alcohol, 100 g/L cellobiose, and 40°C. Furthermore, the enzyme gene (RPG3) of Rhizobium pusense JCM10209 was cloned and expressed in Escherichia coli. Using transformed E. coli BL21 (DE3), we elucidated various enzymatic properties of RPG3, such as substrate specificity. Primary alcohols with up to about 10 carbon atoms were excellent acceptors for the glycosylation reaction, and secondary and tertiary alcohols did not react.

Free Research Field

応用微生物

Academic Significance and Societal Importance of the Research Achievements

ポリフェノールなどの配糖体は食品や医薬品分野等で広く使われ、各種の化合物の配糖体合成法が研究されている。特に、酵素の糖転移反応によるα-配糖体合成は効率が良く実用化例もある。一方、β-配糖体については、高収率かつ高生産な合成手法の報告は無い。薬用植物や医薬の活性成分としてβ-配糖体は有用であり、新しい合成反応の開発が期待されている。そこで本研究では、β-配糖体を優位に合成できる微生物を探索し微生物反応による生産性を明らかにした。また、触媒酵素の性質解明も行い、各種アルコール基質に対する配糖化活性などの性質を明らかにした。