2023 Fiscal Year Annual Research Report
| Project/Area Number |
21K05938
|
|---|
| Research Institution | University of Miyazaki |
|---|
Principal Investigator |
今村 守一 宮崎大学, 医学部, 准教授 (10391442)
|
|---|
| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
岩丸 祥史 国立研究開発法人農業・食品産業技術総合研究機構, 動物衛生研究部門, グループ長 (20355142)
|
|---|
| Project Period (FY) |
2021-04-01 – 2024-03-31
|
| Keywords | プリオン / BSE |
|---|
| Outline of Annual Research Achievements |
本課題では、定型BSEの起源を明らかにすることを目的に１）プリオンの異種動物間伝達を模した、各種反芻類プリオンをシードとした試験管内増幅法（PMCA）によるプリオン様産物の生成、２）ウシ組換えPrPを基質としたPMCAによる組換えプリオンの自発生成を試みた。本年度はPMCAにより生成した、各種プリオン様プロテアーゼ抵抗性プリオン蛋白質(PrPres)の生化学的性状や感染性の有無等を調べた。
L型・H型BSEおよび定型・非定型スクレイピー、シカ慢性消耗病（CWD)プリオンをシードとし、ヒツジ(TgOv)およびウシ(TgBo)、ヒト(TgHu)正常型プリオン蛋白質（PrP）を発現する形質転換マウス脳乳剤を基質としてそれぞれPMCAを 行った。その結果、H型BSEおよび定型スクレイピー、CWDプリオンをシード、TgOvおよびTgBo、TgHu脳乳剤を基質とした場合、PrPresの生成が認められた。生成したPrPresについて生化学的性状解析およびバイオアッセイを行ったところ、H型BSEプリオンとTgOv脳乳剤の組み合わせ、H型BSEプリオンとTgHu脳乳剤の組み合わせで定型BSE様プリオンの生成が認められた。これらの結果は、H型プリオンは異種動物への伝達および順化の過程で定型BSEプリオン様に性状が変化すると考えられた。
昆虫細胞発現系で産生した組み換えウシPrPを基質としたシード非存在下におけるPMCAでウエスタンブロッティングによるバンドパターンが異なる複数のPrPresが自発生成した。そのうちのひとつのPrPresをTgBoマウスに接種した結果、プリオン病の症状を示し、脳内に異常型PrPの蓄積が認められた。これらの結果はBSEが孤発的に生成する可能性を示しており、定型BSEプリオンも自発生成したことを示唆している。
|
