2023 Fiscal Year Annual Research Report
Epidemiological clarifications and evaluation of the pathogenesis about novel zoonotic Campylobacter distributed among wild lives
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21K05962
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| Research Institution | Nihon University |
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Principal Investigator |
壁谷 英則 日本大学, 生物資源科学部, 教授 (10318389)
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2021-04-01 – 2024-03-31
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| Keywords | Campylobacter / 野生動物 / 鹿 / 猪 / 病原性 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
2022年1月から2023年8月にかけて、16道府県で捕獲された鹿292頭および、7県で捕獲された猪76頭から直腸便を供試した。各糞便1gを9mlのPreston培地に接種し、微好気条件下、37℃および42℃で48時間増菌培養後、mCCDA寒天培地およびスキロー血液寒天培地で微好気条件下、37℃および42℃で48時間分離培養した。純培養したコロニーからDNAを抽出し、PCR法で菌種を同定した。さらにPCR法によりhtrAの保有状況を検討した。、一部の分離株をCaco-2細胞に感染させ、TER値を測定し、ヒト腸管上皮細胞への病原性を評価した。
鹿は292頭中18頭（6.2%）からCampylobacterが分離された。その内、C. jejuniおよびC. coliは分離されず、C. hyointestinalis（Ch）は16頭（5.5%）、同定できなかったCampylobacterは2頭（0.7%）から分離された。猪は76頭中36頭（47.4%）からCampylobacterが分離され、鹿よりも有意（p<0.01）に高率にCampylobacterを保菌していた。その内、C. jejuni（Cj）は分離されず、C. coli（Cc）は1頭（1.3%）、Chは30頭（39.5%）、同定できなかったCampylobacterは7頭（9.2%）から分離された。
Ch分離株の全ての株はhtrAを保有していた。Caco-2細胞に各菌株を感染させたところ、感染0時間後のTER値を100%とした時の感染24時間後のTER値の比は、非感染細胞は93.9%、 E. coli DH5α株は98.2%であったのに対して、Cj標準株は59.6%、Ch標準株は72.2%、Ch分離株は74.7%～89.0%であった。さらに、一部のCh分離株は標準株よりもTER値の比が有意（p<0.05）に高値を示した。
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