2021 Fiscal Year Research-status Report
Absorption mechanism of nucleosides and their analogs in the gastrointestinal tract
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21K06678
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| Research Institution | Tokyo University of Pharmacy and Life Science |
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Principal Investigator |
井上 勝央 東京薬科大学, 薬学部, 教授 (50315892)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
樋口 慧 東京薬科大学, 薬学部, 助教 (10625304)
岸本 久直 東京薬科大学, 薬学部, 助教 (80723600)
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| Project Period (FY) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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| Keywords | トランスポーター / ヌクレオシド / 輸送 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
小腸上皮細胞の側底膜におけるヌクレオシドおよびその誘導体の輸送を担う新たなトランスポ―ター分子を同定し、それらの体内動態における寄与を明らかにすることを目的に、本年度（2021年度）は以下の検討を行った。
・ヌクレオシドトランスポーターであるCNT1/2の小腸内の発現分布様式と一致するオーファントランスポーター分子を遺伝子発現データベースから抽出し、候補遺伝子としてSLC16A5 (MCT5) を同定した。
・RT-PCRにより、MCT6はヒトおよびラット小腸において高発現していることが示された。同様にヒト小腸上皮細胞のモデル細胞株であるCaco-2細胞におけるMCT6 mRNAの発現も認められた。
・BiFC（Bimolecular Fluorescence Complementation）法により、MCT1（MCT6と同じSLCファミリーメンバー）と相互作用することが報告されているシャペロン分子CD147が、MCT6と複合体を形成することが示唆された。さらに、GFP標識したMCT6およびCD147の共発現により、MCT6が細胞膜へ局在することが明らかとなった。
・HEK293細胞を用いたMCT6発現系において、MCT6はピリミジン核酸の前駆体であるオロト酸を輸送基質とすることが明らかとなった。さらに本輸送活性はCD147の共発現により増強した。
以上の結果より、詳細が不明であったオーファントランスポーターであるMCT6は、小腸上皮細胞に高発現し、シャペロン分子CD147と複合体を形成することで細胞膜に局在し、ヌクレオシド前駆体であるオロト酸の輸送を行うことが示唆された。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
ヌクレオシド前駆体の輸送を担う新たなトランスポ―ター分子の同定に成功し、そのトランスポ―ターに関わる重要な知見を得ることができたため。
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| Strategy for Future Research Activity |
生理的役割を探るため、MCT6によるオロト酸の輸送解析および核酸輸送を直接検出するための方法論の確立、及びMCT6と医薬品との相互作用などに関する解析を進めていく。
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