2023 Fiscal Year Annual Research Report

Ym1陽性単球由来マクロファージによる肝線維症の進展機序解明

Research Project

Project/Area Number	21K06877
Research Institution	Tokyo University of Pharmacy and Life Science
Principal Investigator	浅野謙一東京薬科大学, 生命科学部, 准教授 (10513400)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	濱田理人筑波大学, 医学医療系, 准教授 (20567630)
Project Period (FY)	2021-04-01 – 2024-03-31
Keywords	単球 / マクロファージ / 肝臓 / 線維化 / MASH / EGR2 / 分化
Outline of Annual Research Achievements	C57BL/6マウスにコリン欠乏高脂肪食（CDA-HFD）を投与し、代謝障害関連脂肪肝炎(MASH)を誘導した。MASH誘導マウスの骨髄単球、末梢血単球、肝臓単球と肝臓マクロファージにおける遺伝子発現をRNAシークエンス解析し、肝臓に浸潤後の単球で最も発現の亢進する転写因子Egr2を同定した。単球・マクロファージでEgr2を欠損したマウス(Egr2-cKOマウス)を作製し、そのマウスにおける単球由来マクロファージの分化や線維化の進展を解析することで、MASHの病態形成におけるEgr2の役割を評価した。MASH誘導Egr2-cKOマウスにおける単球や、単球由来マクロファージの割合はMASH誘導野生型マウスと同程度だった。しかし、Egr2-cKOマウスでは、MASHの肝線維量が有意に減少した。続いて、肝臓における単球とマクロファージの変化を一細胞RNAシークエンスで詳細に解析した。Egr2-cKOマウスではLy6CとF4/80で定義される単球由来マクロファージの割合は、野生型と同程度だったが、単球から線維化マクロファージ(hLAM)への分化が抑制され、hLAMとも常在マクロファージとも異なるマクロファージサブセット(moKC)へと分化が偏向していることが分かった。これら一連の結果は、Egr2が肝臓に浸潤した単球からｈLAMへの分化を促進し、それが肝線維症を進展させることを意味する。続けて、肝臓に浸潤した単球にEgr2発現を誘導する環境要因を探索した。骨髄誘導マクロファージを長鎖飽和脂肪酸（パルミチン酸など）存在下で培養すると、Egr2レベルが亢進すること、反対に長鎖一価不飽和脂肪酸は飽和脂肪酸（オレイン酸など）によるEgr2亢進を抑制することを見出した。最後に、オレイン酸の経口投与が、MASHに伴う肝線維症を改善することを生体レベルで証明した。