2022 Fiscal Year Research-status Report
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21K06982
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| Research Institution | National Center for Child Health and Development |
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Principal Investigator |
上野 瞳 国立研究開発法人国立成育医療研究センター, 小児血液・腫瘍研究部, 上級研究員 (30435630)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
進導 美幸 国立研究開発法人国立成育医療研究センター, 実験動物管理室, 研究員 (50866233)
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| Project Period (FY) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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| Keywords | Bcor / 小児がん |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本課題は、BCOR遺伝子内縦列重複変異(BCOR-ITD)を有する腫瘍で認められる特徴的な遺伝子発現変化やエピゲノム修飾変化が、この変異によりどのようにもたらされているのかを明らかにすることを目的し、治療法開発への足掛かりとなることを目指した研究であり、ゲノム編集により作成したBcor変異マウスおよびBcor変異マウスから樹立した細胞の分子生物学的解析を行う。
令和4年度は、昨年度に引き続きBcor変異マウスのB6マウスを用いた戻し交配による次世代の作出、野生型およびBcor変異マウスES細胞の胚葉体（Embryoid Body）およびBcor変異マウスから樹立した線維芽細胞の分子生物学的解析を行った。
Bcor変異マウスは、B6マウスの戻し交配において出生率や死亡率が高く繁殖維持が困難であることが明らかとなったため、計画を一部変更して他系統への戻し交配の検討を開始した。さらに変異マウスは尾が曲がる特徴が認められるため、死亡した成体マウスのCT撮影や透明骨格標本（成体及び仔マウス）を作製し、骨格異常の有無について観察し評価した。
野生型およびBcor変異マウスES細胞の胚葉体についてRNA-seq解析を行ったところ、Bcor変異細胞は野生型と異なる遺伝子発現が生じることが明らかとなった。Bcor変異マウス線維芽細胞についてもRNA-seqによる遺伝子発現解析およびReduced representation bisulfite sequencing（RRBS）によるDNAメチル化解析を実施し、今後より詳細な解析を検討している。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
変異マウスの維持は困難な状況が生じやや時間を要したが、現在は改善している。
細胞を用いた実験は、当初の計画通りにNGS解析による遺伝子発現解析およびDNAメチル化解析を開始しており、順調に進展している。
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| Strategy for Future Research Activity |
当初の計画通りに、令和4年度に取得したデータからBcor-ITD変異の標的領域を検索し、分化誘導後の細胞や変異マウスの該当する領域におけるDNAメチル化修飾や遺伝子発現について解析を行う予定とする。
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| Causes of Carryover |
マウスの繁殖に困難な状況が生じ、飼育費が予定よりも少額となったために次年度繰り越しが生じた。 次年度使用分は、マウスの維持・保存、解析のための物品費として使用する。翌年度請求分は、当初の計画通りに使用する。
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