2023 Fiscal Year Annual Research Report
エンドソーム上でEGFRの分解・リサイクルを決定する新規分子基盤
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21K07104
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| Research Institution | Fukushima Medical University |
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Principal Investigator |
植村 武文 福島県立医科大学, 医学部, 准教授 (80548925)
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| Project Period (FY) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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| Keywords | EGFR / メンブレントラフィック / ゴルジ体 / エンドソーム |
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| Outline of Annual Research Achievements |
1. gamma1を含むAP-1複合体（adaptor protein complex-1）の機能解析。gamma1を含むAP-1複合体の機能解析がリサイクリングエンドソーム上でEGFR(上皮成長因子受容体)を認識し、細胞膜にリサイクルすることを見出し、論文公表を行った（Oncogenesis 2021）。過去に観察したGGA2ノックダウンの表現型がgamma1ノックダウンの表現型と類似しており、その原因が細胞膜へのEGFRリサイクル異常であることを明らかにした。 また、乳癌由来のSKBR-3細胞で恒常的にgamma1をノックダウンし、増殖・移動・浸潤への影響を解析した。
2. gamma2を含むAP-1複合体の機能解析。恒常的にgamma2サブユニットをノックダウンした、肺がん由来のH1975細胞と、正常網膜色素上皮由来のARPE-19細胞を作製した。ノックダウン細胞ではAP-1複合体のsigmaサブユニットの発現量が顕著に減少したが、他のサブユニット（mu、beta、gamma1サブユニット）の発現量には影響しなかった。ゲル濾過により、gamma2ノックダウンによるAP-1複合体の発現量を解析したところ、影響が見られなかった。
gamma2サブユニットを含むAP-1複合体の局在をgamma2抗体を用いた免疫染色により解析したところ、gamma2陽性構造は細胞質中にドット構造として存在し、それはgamma1と共局在していた。gamma1はリサイクリングエンドソームマーカーであるRab11と共局在する事から、以上の結果はgamma2サブユニットを含むAP-1複合体もリサイクリングエンドソームに発現する事を示唆する。gamma2サブユニットを恒常的にノックダウンしたH1975細胞、及びARPE-19細胞の増殖能を解析したところ、gamma2ノックダウンで顕著に低下していた。
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[Journal Article] Endosomal protein expression of γ1-adaptin is associated with tumor growth activity and relapse-free survival in breast cancer2024
Author(s)
Hoshi N, Uemura T, Tachibana K, Abe S, Murakami-Nishimagi Y, Okano M, Noda M, Saito K, Kono K, Ohtake T, Waguri S
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Journal Title
Breast Cancer
Volume: 31
Pages: 305～316
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] STING signalling is terminated through ESCRT-dependent microautophagy of vesicles originating from recycling endosomes2023
Author(s)
Kuchitsu Y, Mukai K, Uematsu R, Takaada Y, Shinojima A, Shindo R, Shoji T, Hamano S, Ogawa E, Sato R, Miyake K, Kato A, Kawaguchi Y, Nishitani-Isa M, Izawa K, Nishikomori R, Yasumi T, Suzuki T, Dohmae N, Uemura T, Barber GN, Arai H, Waguri S, Taguchi T
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Journal Title
Nature Cell Biology
Volume: 25
Pages: 453～466
DOI
Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
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