2021 Fiscal Year Research-status Report
EmmprinとCD73の結合阻害薬を開発するための基盤研究
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21K07110
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| Research Institution | Fukuoka University |
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Principal Investigator |
青木 光希子 福岡大学, 医学部, 講師 (80469379)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
濱田 義浩 福岡大学, 医学部, 准教授 (10341439)
古賀 佳織 福岡大学, 医学部, 講師 (40572433)
濱崎 慎 福岡大学, 医学部, 准教授 (90412600)
角田 俊之 福岡大学, 医学部, 准教授 (70444817)
松本 太一 福岡大学, 薬学部, 講師 (80570803)
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| Project Period (FY) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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| Keywords | Emmprin / CD73 / 腫瘍間質相互作用 / 浸潤 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
Emmprinは主に腫瘍細胞上にのみ発現しているが、CD73は腫瘍細胞と線維芽細胞の両方に発現している。腫瘍細胞と線維芽細胞を共培養し、蛍光2重染色およびPLA法(Proximity ligationassay; 2つの蛋白が近接して存在している場合にシグナルが観察される)を行うと、EmmprinとCD73が共発現していることが観察される。一方、腫瘍細胞単独では共発現がほとんど見られない。腫瘍細胞上のCD73は保持された状態で、線維芽細胞上のCD73のみをsiRNAで抑制すると、MMP-2の産生は抑制され、それに対し腫瘍細胞上のC73のみをsiRNAで抑制してもMMP-2産生は抑制されなかった。これらの事実より、腫瘍細胞上のEmmprinと線維芽細胞上のCD73がtrans-mannerによって結合し、MMP-2の産生を調整している可能性が示唆された。現在、他の細胞株（乳癌細胞株）を用いて同様の検討を行っている。SCC細胞株と線維芽細胞を３D-cultureで共培養し、CD73抑制による浸潤抑制を確認した。siRNAを加えなかった共培養細胞およびcontrol siRNAを加えた共培養細胞と比較した。CD73siRNAを加えた共培養細胞ではspheoridから伸長する細胞が明らかに抑制されていた。これまでに、腫瘍細胞におけるEmmprinの発現またはCD73の発現による予後との相関は報告されているが、腫瘍細胞上のEmmprin発現と間質におけるCD73発現の両者を同時解析した報告はない。頭頸部扁平上皮癌、乳癌におけるパラフィン包埋切片を用いて、免疫染色を行い、再発、リンパ節転移、予後との相関についての解析を実行中である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
腫瘍間質相互作用を検討するうえで、不死化した線維芽細胞を実験に用いているが、不死化した線維芽細胞の継代数がすすみ、やや細胞の形質が変わってきている。線維芽細胞の増殖能が亢進し、腫瘍細胞と線維芽細胞の共培養でMMP-2の産生増強が確認できない場合がでてきた。凍結ストックを用いて継代数を以前のものに戻して再実験を行うと同時に、他の不死化線維芽細胞株を用いるため、新規で細胞株を購入して実験を再度スタートさせている。このように、実験に最も重要な線維芽細胞株の状態が安定していないため、in vitroの実験については当初の予定よりも遅れが生じている。
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| Strategy for Future Research Activity |
細胞株の状態が安定したのちに、in virtoの実験をなるべく進めるようにする。これまで用いていた類上皮細胞株、扁平上皮細胞株に加え、乳癌細胞株を用いた実験も同時並行で行う。さらに、共同研究者の協力を得ながら、パラフィン包埋切片を用いた免疫染色および臨床病理学的検討を進めていく。
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Research Products
(14 results)
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[Journal Article] Ependymoma-like tumor with mesenchymal differentiation harboring C11orf95-NCOA1/2 or -RELA fusion: A hitherto unclassified tumor related to ependymoma.2021
Author(s)
Tomomasa R, Arai Y, Kawabata-Iwakawa R, Fukuoka K, Nakano Y, Hama N, Nakata S, Suzuki N, Ishi Y, Tanaka S, Takahashi JA, Yuba Y, Shiota M, Natsume A, Kurimoto M, Shiba Y, Aoki M, Nabeshima K, Enomoto T, Inoue T, Sasaki A, Nishiyama M, Ichimura K, Shibata T, Hirato J, Yokoo H, Nobusawa S.
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Journal Title
Brain Pathol.
Volume: 31(3)
Pages: 1-14
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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