2022 Fiscal Year Research-status Report
MyD88阻害によるKRAS変異大腸がんの新規治療法の開発
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21K07114
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| Research Institution | Aichi Cancer Center Research Institute |
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Principal Investigator |
梶野 リエ 愛知県がんセンター(研究所), がん病態生理学分野, 主任研究員 (20633184)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
青木 正博 愛知県がんセンター(研究所), がん病態生理学分野, 副所長兼分野長 (60362464)
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| Project Period (FY) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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| Keywords | 大腸がん / 大腸がんマウスモデル / 大腸腫瘍オルガノイド |
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| Outline of Annual Research Achievements |
がんの薬物療法は、正常細胞への悪影響が少なく効果的にがん細胞の増殖を抑制するものが理想的である。大腸がんに対する化学療法は進歩しているが、治療効果は十分とは言い難く、新たな治療戦略が求められている。
私たちはこれまでに、MyD88の機能阻害が腸管正常細胞の増殖には大きく影響せずにWnt経路に変異を持つ大腸腫瘍細胞の増殖を抑制し、細胞死を誘導することを明らかにした。また、その効果はKras変異があると低下することを示唆する結果を得た。本研究では、大腸腫瘍細胞のKras変異がMyD88阻害による増殖抑制・細胞死誘導に対して抵抗性をもたらす分子メカニズムを解明し、Kras変異の影響を打ち消す標的因子の候補を得ることを目的としている。
前年度実施したRNA-seq解析の結果から挙げられた標的因子の候補について、今年度はまずヒト検体を対象とした各種データベースの情報を元に候補因子の絞り込みを行い、解析に進めるため優先順位をつけた。絞り込んだ候補因子のうち、3つの遺伝子について解析を進めた。マウス腸管腫瘍由来のオルガノイド培養や二次元培養、ヒト大腸がん細胞において発現を抑制させたところ、1つの遺伝子については増殖・生存への影響が顕著に見られ、1つの遺伝子の遺伝子については弱く見られた。また、今後の検討に用いる大腸がんマウスモデルの作出を終えた。
さらに研究を進め、候補因子の中から腫瘍細胞の増殖・生存を抑制し、かつ正常細胞への悪影響が少ない標的因子を同定することにより、革新的な大腸がん治療戦略を開発する基盤につながることが期待される。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
令和3年度に実施したRNA-seq解析の結果から挙げられた標的因子の候補について、in vitroでの解析が少し遅れていると考える。今後の検討に用いる大腸がんマウスモデルの作出は終えており、順調であると考える。
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| Strategy for Future Research Activity |
令和5年度は、すでにin vitroでの解析を進めている標的因子の候補についてさらに検討を進める。また、他の候補因子についても、阻害剤やドキシサイクリン(Dox)誘導性shRNA/遺伝子発現とMyD88阻害剤との併用により、CKオルガノイドの生育がCオルガノイドと同程度まで抑制されるか検討する。また、ヒト大腸がん組織検体より作製したオルガノイドでも検討する。
in vitroでの検討の結果、有力と考えられる候補因子ついて、大腸がんマウスモデルを用いた個体レベルでの検討を行う。大腸がんマウスモデルとしては、大腸がん初期のマウスモデルであるApc変異マウスを用いる。また、標的因子について個体レベルで検討するために必要なMACreとMAK-Cre (M:MyD88FL/FL, A:ApcΔ716, K:LSL-KrasG12D, Cre:Villin-CreERT2) 複合変異マウスの作出は終えたので、繁殖させて実験に必要な匹数を準備し、腸管腫瘍形成を指標にした検討を行う。
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| Causes of Carryover |
次年度使用額が生じた理由としては、主に研究計画１年目に予定していた定量的プロテオーム解析の実施を費用の面から見送ったため。また、大腸がんマウスモデルを用いた研究をまだ開始していないため。
次年度は標的因子の候補についてin vitroでの解析を進めながら、大腸がんマウスモデルを用いた検討も開始する。次年度使用分の助成金は、これらの実験の遂行で必要になる多くの試薬の購入費やマウス維持費にあてる。
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Research Products
(1 results)
