Mechanism of drug resistance by microRNA-DNA repair in multiple myeloma

2022 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 21K07312
• Research Institution: Gunma University
• Principal Investigator: 齋藤 貴之 群馬大学, 大学院保健学研究科, 教授 (80375542)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 小田 司 群馬大学, 生体調節研究所, 助教 (10323643) ; 笠松 哲光 群馬大学, 大学院保健学研究科, 助教 (60737542) ; 後藤 七海 群馬大学, 大学院保健学研究科, 助教 (80782482)
• Project Period (FY): 2021-04-01 – 2024-03-31
• Keywords: 低酸素 / APEX1 / 多発性骨髄腫

Outline of Annual Research Achievements

・多発性骨髄腫株のKMS27を使用して、Deferoxamineを使い化学的低酸素状態を作成し、低酸素で誘導される遺伝子のKDM3A, HK2, VEGFAのmRNA発現を検討して、KDM3Aが上昇していることを確認した。KMS27にDeferoxamine（＋）と（ー）で次世代RNA Seqを用いて、RNA発現量を検討した。HIFやケモカイン応答の上昇が確認された。これらが多発性骨髄腫の病態に関与する可能性が示唆された。・DNA修復遺伝子のKMS27のAPE1 knockdownではAPE1の抑制が不十分であり、細胞増殖の機序解明には至らなかったため、knockout株を作製した。KMS27KO株の生物学的特徴を検討する。
・APEX1遺伝子WT細胞株、APEX1遺伝子KO細胞株を用いて、化学的低酸素状態にした時の影響を検討する

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

低酸素による細胞株の影響を検討したが、細胞培養で低酸素を安定的に作ることが困難だっため、他の条件の低酸素状態を作成した。臨床検体の検討はこれからである。

Strategy for Future Research Activity

1) 化学的低酸素条件を選択した。
2) KMS27細胞株を用いて、RNAseqで解析した。
2) DNA修復遺伝子のAPEX1KO細胞株を作成した。
3) 今後は、その細胞株を使用して、網羅的にRNAやmicorRNAの発現をRNAseqで解析する。
4) 純粋な低酸素条件も検討する。

Causes of Carryover

低酸素条件を作成するのに時間がかかったため、また、KO細胞株の網羅的解析を次年度にしたことによる計画の変更のため。