Understanding mechanism of next generation stem cell mobilization method through the conventional method.

2023 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 21K07386
• Research Institution: Gunma University
• Principal Investigator: 横濱 章彦 群馬大学, 医学部附属病院, 准教授 (40323365)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 関上 智美 群馬大学, 医学部附属病院, 医員 (00727753) ; 齋藤 貴之 群馬大学, 大学院保健学研究科, 教授 (80375542)
• Project Period (FY): 2021-04-01 – 2025-03-31
• Keywords: 末梢血幹細胞動員 / CXCR2 / CXCR2リガンド / MMP9 / G-CSF

Outline of Annual Research Achievements

昨年度までの末梢血幹細胞動員を行うドナーにおけるMMP9の発現解析はヒト検体を用いた研究であったが、研究課題であるCXCR2リガンドの発現とCXCR2-MMP9のシグナル伝達によるMMP9発現の関連をリアルタイムで解析するため、2022年度はマウスを用いて末梢血幹細胞動員のモデルを作成した。G-CSF投与後にCXCR2リガンドの経時間的な発現変化について解析した。G-CSF投与により、末梢血のLineage(-)/c-kit(+)/Sca1(+)(LSK)細胞は徐々に増加し、5日目には48.5個/5000個ビーズとなりヒトと同様に経時間的な末梢血幹細胞動員が認められた。マウスCXCR2リガンドは、CXCL1, 2, 3, 5, 7, 15の６つが知られておりrealtime PCR法で解析した。その結果、G-CSF投与5日目に投与前と比べて有意と思われる2倍以上の発現の変化を認めたのは、CXCR1, 2, 3, 15の4つであり、CXCL5, 7にはほとんど変化は見られず、G-CSG投与による末梢血幹細胞動員においてはその役割は否定的だった。最も発現の変化が認められたのはCXCL15であり、投与前に約37倍に増加した。今までの末梢血幹細胞動員に重要とされていたCXCL2は8.1倍、CXCL1は3.6倍の増加であった。CXCL2, 3はG-CSF投与1日目で4.5倍ほどに発現増加の後、3日目には2倍程度まで減じ、その後増加に転じた。CXCL15は日毎に発現量が増した。
今年度は、骨髄細胞の分画ごとのCXCR2リガンドの発現を見ている。

Current Status of Research Progress

4: Progress in research has been delayed.

Reason

研究協力者である大学院生の健康上の理由があり、約1年程度研究が進まなかった。2023年度も当初は研究の遅れが目立ち、研究が進んでいない。研究方法を大きく変え2024年度での研究の完成を目指している。

Strategy for Future Research Activity

G-CSF投与前後の骨髄細胞を用いてシングルセル解析を行い、CXCR2リガンドの発現と、発現している細胞の同定を行う予定である。さまざまな実験も業者に委託し、研究者は主に解析をすることで研究を進めたい。

Causes of Carryover

研究の遅れのため研究費の十分な使用ができない。