2023 Fiscal Year Annual Research Report
エキソソームによるαシヌクレインの末梢組織から中枢神経への拡散機序の解明
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21K07444
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| Research Institution | Juntendo University |
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Principal Investigator |
常深 泰司 順天堂大学, 大学院医学研究科, 准教授 (50401344)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
赤松 和土 順天堂大学, 大学院医学研究科, 教授 (60338184)
竹下 幸男 山口大学, 大学院医学系研究科, 助教 (70749829)
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| Project Period (FY) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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| Keywords | パーキンソン病 / アルファシヌクレイン / 血管脳関門 / iPS細胞 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
３年間の本研究において、従来はヒト不死化細胞を用いてしか作成されなかった血液脳関門（BBB）モデルをiPS細胞から各々の細胞に分化し構築し得たことが最大の成果と考えられる。血管内皮細胞への分化はCD31、Claudin5の、壁細胞はPDGFRBの、星状細胞はGFAPの発現を免疫染色にて確認した。さらに血管内皮細胞をインサート膜内へ、壁細胞と星状細胞をプレート底に培養することで、血管内皮細胞の一層構造を維持したiBBBモデルを確立した。本来のBBB構造により近い三重培養モデルを用いて、経上皮電気抵抗（TEER）と蛍光デキストランにてサイズ依存性の透過性とタイトジャンクション機能を有することを、蛍光トランスフェリンを用いてレセプター依存性の透過性を定量評価することができた。
最終年度は、パーキンソン病モデルとして用いたSNCA A53T変異血管内皮細胞ではレセプター依存性の透過性の亢進を認めた。さらにエキソソームに含有されることによるα-シヌクレイン(a-syn)透過性の変化を検討しえた。iBBBモデルにa-synが暴露することにより、iBBBのレセプター依存性透過性が亢進することを見出した。これらの結果は、パーキンソン病ではBBBの透過性が亢進し、全身から中枢神経へa-synが移行し易い状態になっていることを意味し、申請者の血流を介したa-synの伝播という仮説を支持する結果であった。a-synを輸送するレセプターの解析ではプロテオミクスでは新規のレセプターは同定されず、ソーティリンなど既知のレセプターの発現に変化はなかったため、既知のレセプターの機能の亢進によるものと考えられた。
iBBBの確立により、パーキンソン病以外の他の神経変性疾患、免疫疾患、感染症におけるBBBの機能変化を解析できることになったという点で今後の発展性の高い成果があったと言える。
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