2021 Fiscal Year Research-status Report
Myostatin antisense nucleic acid therapy for rhabdomyosarcoma
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21K07762
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| Research Institution | Kobe Gakuin University |
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Principal Investigator |
前田 和宏 神戸学院大学, 総合リハビリテーション学部, 研究員 (60443024)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
西村 範行 神戸大学, 保健学研究科, 教授 (00322719)
松尾 雅文 神戸学院大学, 総合リハビリテーション学部, 特命教授 (10157266)
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| Project Period (FY) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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| Keywords | アンチセンス核酸 / ミオスタチン / 横紋筋肉腫 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
横紋筋肉腫(Rhabdomyosarcoma:RMS)は、筋原性の高悪性腫瘍で集学的治療により予後は改善した。しかし、治療抵抗群もあり、より効果的な治療法の開発が喫緊の課題である。ミオスタチンは筋肉の増殖を抑制するミオカインで、筋萎縮の治療法としてミオスタチン阻害に関する研究が盛んである。申請者は、ミオスタチン遺伝子(MSTN)のスプライシングを阻害してミオスタチンの産出を抑えるアンチセンス核酸(MSTN-ASO)の開発に成功した。このMSTN-ASOは想定通り筋芽細胞の増殖を促進した。一方で、同じMSTN-ASOがRMS細胞の増殖を阻害することを示唆する結果が得られていた。
今年度は、まず、RMS細胞でMSTN-ASOが増殖を阻害することを明確にした。RMS細胞のASOによる増殖阻害とMSTN発現レベルを比較した結果、MSTN-ASOによる増殖阻害はMSTNが発現しているRMS細胞でみられることが示された。MSTN-ASOによる増殖阻害がみられたRMS細胞ではMSTN-ASOによるMSTN mRNAの産生抑制と、ミオスタチンシグナルの低下が観察された。次にRMS細胞の増殖阻害を細胞周期に注目して検討を行った。細胞周期インジケーターFast-Fucciを利用し細胞周期停止を検証したところ、S期の進行が阻害されていることが示唆された。今後は細胞周期停止に関わる因子の同定とマウスxenograftモデルでの解析を進める。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
MSTN-ASOのRMS細胞の増殖阻害を明らかにした。この増殖阻害は、MSTN-ASOがMSTN mRNAの産生を抑制し、ミオスタチンシグナルを低下させることにより引き起こされると考えられた。さらに、MSTN-ASOにより細胞周期の停止が引き起こされることを確認した。
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| Strategy for Future Research Activity |
1) RMS細胞の細胞周期停止に関わる因子を明らかにする。まず、細胞周期関連因子の発現を解析する。
2) ヌードマウスxenograftにMSTN-ASOを投与し、その腫瘍抑制効果を明らかにする。①RMS細胞移植とMSTN-ASO投与を同時に行い、腫瘍の拡大を検証する。②RMS細胞移植後、腫瘍をあらかじめ拡大させておいた後にMSTN-ASOを投与して大きさの変化を検証する。腫瘍の拡大を評価した後に腫瘍を摘出し、MSTN-ASOの有無で、上記の解析で同定した細胞周期停止因子の発現および活性化について検証を行う。
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