2022 Fiscal Year Research-status Report
Comprehensive analysis of the molecular basis of stunted growth in IGF-1 resistance
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21K07797
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| Research Institution | Tottori University |
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Principal Investigator |
難波 範行 鳥取大学, 医学部, 教授 (10379076)
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| Project Period (FY) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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| Keywords | インスリン様成長因子-1 / ヒトiPS細胞 / 軟骨細胞 / 成長軟骨帯 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
小児内分泌診療において最も重要なテーマの一つは成長障害である。成長は成長軟骨帯の伸長によって起こり、成長促進因子として最も古くから研究され、臨床応用もされているのは、成長ホルモン(GH)/インスリン様成長因子-1(IGF-1)である。ところが、GH/IGF-1がどのような分子基盤を介して成長軟骨帯の伸長を促進するのか未だに不明である。本研究では、ヒトiPS細胞を軟骨に分化誘導し、IGF-1受容体の下流の分子を網羅的に解析することで、IGF-1によるヒト成長軟骨伸長作用の分子基盤の解明を目指す。
昨年度からヒトiPS細胞からヒト軟骨細胞を分化誘導する系の最適化を行なっている。培養の簡便さからフィーダー細胞フリーの条件の確立を試み、まずはlaminin 511-E8でプレートをコーティングしたが、軟骨への分化誘導効率が悪く、断念した。
本年度は、Yamashitaらの論文（STEM CELLS Transl Med. 2021）を参考に、プレートのコーテングをMatrigelに変更して分化誘導効率を検討したが、この方法でも分化効率は上昇するものの、安定して十分な分化は得られないと判断した。以上の結果から、軟骨への分化誘導をフィーダー細胞を使う系に変更した。研究グループ内ではフィーダー細胞フリーのiPS細胞しか扱った経験しかないため、大阪大学大学院生命機能研究科組織生化学研究室（妻木範行教授）の協力を仰いで系の変更を進めている。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
コロナ禍のため臨床業務が増加し、時間の確保が困難であった。また、大阪大学との連携も困難であった。
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| Strategy for Future Research Activity |
軟骨細胞への分化誘導にはフィーダー細胞を使う培養系に変更する必要があると考えられるため、大阪大学と連携して培養系の変更を行う。また、これまでコロナ対応などで実験・連携に十分時間を割くことができなかったが、次年度はコロナ対応に要するエフォートは減少すると予想されるため、実験・連携を進めやすくなると考えられる。
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| Causes of Carryover |
本年度は昨年度と同様に、コロナ禍のため臨床業務が増加し、実験時間の確保が困難であった。特に、フィーダー細胞を用いたヒトiPS培養系をベースとした軟骨細部分化誘導系の確立を大阪大学大学院生命機能研究科組織生化学研究室と連携して行う予定であったが、実際には連携は困難であった。次年度は社会状況の変化にともなってコロナ対応に要するエフォートは減少すると予想される。実験・連携のための時間が確保しやすくなると考えられ、これまでに施行できていないRNA-Seq解析等の実験を十分に行う。また、時間の節約のため、変異遺伝子のノックイン細胞など、外注可能なものに関しては外注して、迅速に実験を進める。
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[Presentation] The background of XLH patients with burosumab treatment and its short-term effectiveness and safety of: Interim analysis of the SUNFLOWER study2022
Author(s)
Michigami T, Kang HG, Namba N, Ito N, Kubota T, Shintani A, Kabata D, Kanematsu M, Nishida Y, Fukumoto S, Ozono K
Organizer
The 12th Asia Pacific Paediatric Endocrine Society (APPES) Biennial Scientific Meeting
Int'l Joint Research
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[Presentation] Patient-reported outcomes from a randomized open-label phase 3 trial comparing burosumab versus conventional therapy in children with X-linked hypophosphatemia: results from the 24-week treatment extension period2022
Author(s)
Padidela R, Whyte MP, Glorieux FH, Munns CF, Ward LM, Nilsson O, Portale AA, Simmons JH, Namba N, Cheong HI, Pitukcheewanont P, Sochett E, Hogler W, Muroya K, Tanaka H, Gottesman GS, Biggin A, Perwad F, Williams A, Nixon A, Sun W, Chen A, Skrinar A, Imel EA
Organizer
The 60th European Society for Paediatric Endocrinology (ESPE) Annual Meeting
Int'l Joint Research
