2022 Fiscal Year Research-status Report
胎盤BDNF/TrkBシグナルを介した胎児脳発達のモニタリング機構
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21K07828
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| Research Institution | Tokai University |
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Principal Investigator |
後藤 優美子 東海大学, 医学部, 客員講師 (50624574)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
石本 人士 東海大学, 医学部, 教授 (10212937)
亀谷 美恵 東海大学, 医学部, 客員准教授 (50338787)
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| Project Period (FY) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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| Keywords | チロシンキナーゼ受容体TrkB / 胎盤 / 母児間クロストーク |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究では、「胎盤におけるBDNF/TrkBシグナルを介した母児間のクロストーク、すなわち胎盤のBDNF/TrkBシグナルを介した胎児脳の発達レベルのモニタリング機構について明らかにすること」を目的とする。
2022年度は、胎盤に発現するTrkBスプライシングバリアント解析結果について報告した。胎児発育不全症例では妊娠週数が早い24 週の症例でTrkB の全てのexonのmRNA発現が認められ，週数が進むにつれて発現が低下する傾向が見られた。BDNFについては重症SGA群においては軽症SGA群と比較して有意に高かった。しかし正常発育例との比較では低い傾向があるものの有意差はなかった。また胎児発育に関わらず多くの症例においてIG like ドメインは発現していた。これらの結果は、既知の主要なTrkBアイソフォームではなく、さらに異なるアイソフォームの存在を暗示していた。
また、これらのmRNA発現が必ずしもタンパク質の発現を反映しないことから、免疫組織化学およびリアルタイムPCRの結果をもとに、T1, T-Shc, full lengthに加えて他のアイソフォームのTrkBの識別をタンパク質レベルで行う必要性が明らかになったため、これらのモノクローナル抗体作成に着手した。TrkBの各アイソフォーム遺伝子コンストラクトをもとにHEK293あるいはA20のそれぞれの培養細胞系に各アイソフォームを発現させ、BALB/cマウスに免疫を行った。
また、母子境界におけるBDNF/TrkB発現がプロゲステロンおよびグルココルチコイドに大きく影響を受けることから、両ステロイドの妊娠免疫調節との関連性および免疫調節におけるプロゲステロンのグルココルチコイドに対する優位性を明らかにし、国際誌に発表した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
2022年度は、臨床検体についてTrkB スプライシングバリアントの発現を解析し、FGRにおける傾向を掴むことができた。また、これらの情報をもとに、どのようなモノクローナル抗体を作成するべきかを明らかにすることができた。すでにモノクローナル抗体作成に着手しており、母子境界の詳細な解析が予定通り行われる可能性が高い。
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| Strategy for Future Research Activity |
モノクローナル抗体を作成したのち、JEG-3あるいはBeWo細胞株を用いてin vitro培養系におけるアイソフォーム発現とBDNFの発現量の変化およびそれに関連して動く関連遺伝子群を同定する。
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| Causes of Carryover |
学会開催形式がオンラインとなり旅費が発生しなかったことや、共同研究者と共同利用可能な消耗品・試料を利用したため物品費が少なかったことにより次年度利用額が生じた。次年度は、学会参加、学会発表に伴う費用、人件費、物品費などに主に予算を使用する予定である。
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