2023 Fiscal Year Research-status Report
Functional analysis of small intestinal paneth cells in RalGAPa2 KO mice
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21K07919
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| Research Institution | Sapporo Medical University |
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Principal Investigator |
林 優希 札幌医科大学, 医学部, 助教 (30892624)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
仲瀬 裕志 札幌医科大学, 医学部, 教授 (60362498)
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| Project Period (FY) |
2021-04-01 – 2025-03-31
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| Keywords | 炎症性腸疾患 / クローン病 / RalGAPa2 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本邦におけるクローン病 (Crohn’s disease: CD) 患者数は増加の一途をたどっているが，疾患の原因は未だ明らかとなっておらず，根治的な治療法は存在しない．申請者の研究室ではこれまでに，大腸上皮における低分子量GTP蛋白質Ralの活性化が，NLRP3 inflammasomeを介した大腸炎及び炎症性大腸発癌(colitisassociated cancer: CAC) に極めて重要であることを報告してきた．さらに，申請者が行った予備検討で，小腸炎症においてもRalの活性化が確認されていることから，RalがCDの小腸病変とも関連している可能性が高いと考え．一方，CD発症の原因の一つとして腸管免疫機構の破綻が考えられており，中でも小腸粘膜免疫におけるPaneth 細胞の役割が注目されている．本研究では，Ral活性化のPaneth細胞機能における役割を解析することにより，CDの病態解明に取り組む．
令和3年度と令和4年度は，SAMP1/YitFcマウスの繁殖，SAMP1/YitFc × RalGAPa2 KOマウス，SAMP1/YitFc × RalGAPa2 KO × NLRP3 KOマウスの作成とphenotypeの同定を遂行中であるが，SAMP1/YitFcマウスの十分な繁殖が得られていない．当施設におけるSAMP1/YitFcマウスの繁殖条件を模索中である．
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
4: Progress in research has been delayed.
Reason
令和4年度に引き続き，令和5年度は当施設におけるSAMP1/YitFcマウスの繁殖条件を模索中したが，未だ繁殖が不十分でありIn vivo,In vitroでの実験に用いる頭数のマウスが得られていない．
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| Strategy for Future Research Activity |
SAMP1/YitFcの繁殖に並行して，SAMP1/YitFc自然腸炎発症モデル以外の炎症モデルを用いて，RalGAPa2 KOマウスとRalGAPa2 KO × NLRP3 KOマウスにおける小腸組織の腸炎やα-defensinの発現の差異，腸内細菌叢の解析，糞便中α-defensin定量を検討中である．またSAMP1/YitFcマウスから樹立したオルガノイドを用いて，RalGAPa2またはNLRP3 shRNAによる遺伝子発現を低下させる実験を検討中である．
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| Causes of Carryover |
実験計画の遅れにより，令和5年度に購入する予定であった物品購入が延期となったため．実験計画の遅れを取り戻した上で，令和6年度分と合わせて物品購入に充填する．
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