2023 Fiscal Year Annual Research Report
腸管粘膜透過性を制御するB細胞機能の解析とクローン病の病態解明
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21K07961
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| Research Institution | Shimane University |
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Principal Investigator |
石原 俊治 島根大学, 学術研究院医学・看護学系, 教授 (80263531)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
三島 義之 島根大学, 学術研究院医学・看護学系, 助教 (30397864)
岡 明彦 島根大学, 学術研究院医学・看護学系, 助教 (80600600)
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| Project Period (FY) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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| Keywords | 腸管粘膜透過性 / クローン病 / 制御性B細胞 / 制御性T細胞 / IL-10 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
これまで私共は、クローン病（CD）では、制御性B細胞（Breg）の機能が減弱していること、dysbiosis環境下では組織の細胞外アデノシン三リン酸（ATP）がBregの機能を低下させること可能性を明らかにしてきた。本研究課題では、「CDにおいては、Bregの異常が腸管粘膜透過性の制御機能を低下させ、腸管炎症増悪に関与する」という仮説を立て、種々の実験モデルを用いてこの仮説を検証することを目的とした。
免疫不全マウスであるRag2-KOマウスを実験に使用した。野生型マウス（C57BL/6）の脾臓からTおよびB細胞を分離調整し、Rag2-KOマウスの腹腔内に投与し、投与4週間後に腸管粘膜透過性をFITCデキストラン法によって評価した。現在までの検討では、T細胞の移入時に比べて、B細胞の移入時に腸管粘膜透過性が低下する傾向を認めた。現在は、本メカニズムにBregの機能が関与するか否かをBregの移入の有無による新たなモデルによって検証中である。
一方、in vitroにおける腸管透過性制御モデルは、trans-wellのapical側に大腸上皮であるCaco-2細胞を培養し、basolateral側にT細胞とB細胞を共培養するモデルを作成し、T細胞とB細胞が上皮の粘膜透過性に与える影響を検証した。培養上皮の透過性は上皮間電気抵抗を測定することで評価した。本検討では、T細胞よりもB細胞と共培養した際に上皮の透過性が低下することが確認され、本結果はin vivoのマウス移入モデルの結果を反映する結果であった。今後はマウスモデル同様に、本変化がBregの機能に依存したものであるかを評価する必要があり、進行中のマウスモデルでの実験結果を踏まえながら、in vitroの新規モデル作成についても検討していく。
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