癌促進型分岐点の制御に着目した新規食道癌治療の分子基盤

2023 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 21K07971
• Research Institution: Kawasaki Medical School
• Principal Investigator: 増田 清士 川崎医科大学, 医学部, 教授 (00457318)
• Project Period (FY): 2021-04-01 – 2024-03-31
• Keywords: RNA結合蛋白質 / 食道扁平上皮がん

Outline of Annual Research Achievements

（1）TIA1aのリン酸化制御
kinase2特異的siRNAおよび特異的阻害剤により、TIA1aの細胞内局在が変化するとともに、細胞増殖が抑制されることが明らかとなった。しかし、kinase2は正常細胞の増殖に必須の役割を果たしていることから重大な副作用が予想され、発現量調節やkinase2の機能を広範囲に抑制する介入法は適当でないと判断した。また、TIA1aのリン酸化部位を含む低分子ペプチドを投与することによって、TIA1aの細胞内局在を変化させることが可能となったが、現状では高濃度かつ短時間の効果しか確認できなかった。
（2）TIA1aの選択的スプライシング制御
SF-X特異的siRNAにより、細胞増殖が有意に抑制されることが明らかとなった。この細胞増殖抑制は強力であり、大半の細胞にアポトーシスを誘導することが可能であった。しかし、SF-Xはがん細胞の増殖だけでなく、正常細胞の分化や増殖に必須の因子であるとの報告があり、発現量調節による介入法はがん細胞に対する選択性が低いことが予想される。このことから、SF-Xの結合領域を含む短鎖RNA分子を発現するプラスミドを作成し、短鎖RNA分子をTIA1a蛋白質に対するスポンジ分子としてアプローチする方法を検討したが、細胞内に充分量のRNA分子を発現させることができず、TIA1遺伝子のスプライシングパターンを変更することができなかった。
（3）介入法の臨床意義
公共データベースに収載されているRNA-seqデータを再解析し、SF-X、kinase2およびTIA1a発現量について検討した。結果、いずれも癌組織で有意に発現が上昇していた。また、kinase2量とTIA1a量ならびにSF-X量とTIA1a量には有意に正の相関があった。このことから、本研究で明らかとなった癌促進機構ならびにこれに対する特異的介入法は臨床上意義のあると示唆される。