C3 glomerulopahtyにおける補体-単球相互作用の解析

2021 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 21K08257
• Research Institution: Kyushu University
• Principal Investigator: 西山 慶 九州大学, 大学病院, 助教 (60645422)
• Project Period (FY): 2021-04-01 – 2024-03-31
• Keywords: C3 glomerulopathy / 単球 / マクロファージ / 補体第二経路

Outline of Annual Research Achievements

C3G症例、IgA腎症症例（疾患コントロール）、健常コントロールより採取した血液検体から回収したPBMCを用いてCD14抗体を用いてmonocyteを染色し、CD14+CD16-（classical）、CD14+CD16+（intermediate）、CD14dimCD16+（non-classical）のsubpopulationに分類し、各群での割合を評価した。同時に他のリンパ球分画(CD3、CD19、CD69)についても解析した。それぞれのsubpopulationでCD80、CD206、HLA-DRの各蛍光標識抗体を用いて活性化を評価した（CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD3-CD19+、CD3-CD56+）疾患群とコントロール群でのリンパ球subsetに一定の傾向はみられなかった。一方、monocyteのsubpopulationについてはnon-classical、intermediateが増加していた。
補体レセプターの発現解析およびproperdin産生能の評価を行っているが、適切な標識抗体が入手できておらず、新たな抗体での予備実験を行っている。
IHCを用いたリンパ球、単球の免疫染色法は確立できたが、活性化マーカー（HLA-DR、CD69）、補体レセプター（C3aR、C5R1、C5aR2）、接着因子（ICAM-1,、VCAM-1、E-selectin）の染色法の確立に時間がかかっている。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

疾患および正常コントロールの症例の収集に時間がかかった。補体レセプターに対するFCM用の抗体入手に時間がかかっている。免疫組織染色に必要な抗体の染色条件が決まらない。

Strategy for Future Research Activity

腎生検標本を用いた浸潤細胞の同定（monocyte/macrophageとそのsubpopulation）、補体レセプターおよびproperdinの局在、糸球体血管内皮細胞の接着分子の発現を解析する。また、PBMCでの補体レセプター発現解析、properdin産生能評価を継続する。
自己炎症性疾患のパネル解析を行う。

Causes of Carryover

昨年度に施行予定の遺伝子パネル検査の実施が遅れており、本年度に同解析を予定している。そのため約80万の予算を本年度に繰り越して使用する予定である。