2021 Fiscal Year Research-status Report
免疫学的腎炎モデルにおけるADAMTS13を介した腎臓での血栓形成機構の解明
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21K08272
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| Research Institution | The University of Tokyo |
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Principal Investigator |
吉田 瑶子 東京大学, 医学部附属病院, 届出研究員 (90649443)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
西 裕志 東京大学, 医学部附属病院, 講師 (90784174)
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| Project Period (FY) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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| Keywords | 免疫学的腎炎 / ADAMTS13 / 補体 / VWF |
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| Outline of Annual Research Achievements |
ADAMTS13は止血因子であるVWFの特異的切断酵素として働く一方で、抗炎症作用も有する血中タンパク質である。本研究は、ADAMTS13欠損（KO）マウスを用いた免疫学的腎炎（NTN）モデルの病態解析を通して、ADAMTS13による腎臓での血栓制御機構を分子レベルで明らかにすること、さらには腎局所に発現する同酵素の役割を解明することを目的としている。
申請者らはこれまでに、野生型（WT）マウスとADAMTS13-KOマウスに当研究室オリジナルのNTS（ラット腎糸球体基底膜に対するヒツジ抗血清）を投与したNTNモデルにおいて、KOマウスでは何らかの機序を介した血栓形成を伴うTTP様症状が惹起され、生存率にも影響がでることを確認した。
令和3年度は、NTS投与後のWT/KOマウスの詳細な解析を進め、KOマウスではWTに比べ血中VWF値の有意な上昇を認めること、さらには各種臓器に認められた血栓の免疫組織染色はVWF抗体陽性であることを確認し、VWFが病態形成の一因であることを明らかにした。さらには、KOマウスに認められるTTP様症状は、組み換えヒトADAMTS13の投与により改善される傾向を認め、ADAMTS13の治療効果も期待された。
さらに、非動化により補体不活化処理を行ったNTSをKOマウスに投与したところ、通常のNTS投与群と比べて生存率や血液学的所見の改善を認めた。一方で、KOマウスではWTマウスに比べてNTS投与後に補体の過剰な活性化が生じていることを示唆するデータも得られ、補体がKOマウスにおけるTTP様症状の進展に何らかの形で関与する可能性が示唆された。
令和4年度は、ADAMTS13-KOマウスのNTNモデルにおけるADADMTS13の治療効果判定や、これら病態への補体の関与をより詳細に解析する。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
当初の計画通り、ADAMTS13-KOマウスのNTNモデルにおけるTTP病態の評価、補体の評価、ADAMTS13の治療効果検討を実施し、一定のデータが得られた。ADAMTS13の治療効果検討に関して、当初の計画ではヒトADAMTS13 におけるVWF切断活性領域を組み込んだアデノ随伴ウイルスベクターを入手し、これを用いて実験を行う予定であった。しかしながら、当初の予定より作業に時間を要しているため、代替手段として組み換えヒトADAMTS13の投与による評価を行った。
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| Strategy for Future Research Activity |
ADAMTS13-KOマウスのNTNモデルに対するADAMTS13の治療効果が期待される結果が得られていることから、今後はより詳細に解析を進める。生存率のみならず、血液学的所見や血中VWF値、補体の変化などについて解析を実施する予定である。
また補体の評価として、これまでに血中C3測定による評価を実施したが、今後は血中C5b-9測定、免疫蛍光染色による糸球体におけるC3沈着の解析、等のより詳細な解析を実施する。さらに、KOマウスではWTに比して補体が易活性化状態にあり、それが血栓傾向増強の一因である可能性も示唆されることから、ADAMTS13-KOマウスのNTNモデルにおける抗補体薬の治療効果についても検討する。
さらには、足細胞発現ADAMTS13の動態解析として、LPS投与による後天性足細胞障害モデルの解析を計画しており、B6マウスに効率的に足細胞障害及び蛋白尿を惹起させうるLPS血清型の比較実験も進める。
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[Journal Article] Antibody recognition of complement Factor H reveals a flexible loop involved in Atypical Hemolytic Uremic Syndrome pathogenesis2022
Author(s)
Yokoo T, Tanabe A, Yoshida Y, Caaveiro JMM, Nakakido M, Ikeda Y, Fujimura Y, Matsumoto M, Entzminger K, Maruyama T, Okumura CJ, Nangaku M, Tsumoto K.
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Journal Title
Journal of Biological Chemistry
Volume: -
Pages: -
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] Infection prevention measures for patients undergoing hemodialysis during the COVID-19 pandemic in Japan: a nationwide questionnaire survey2021
Author(s)
Sugawara Y, Iwagami M, Kikuchi K, Yoshida Y, Ando R, Shinoda T, Ryuzaki M, Nakamoto H, Sakai K, Hanafusa N, Kashihara N, Nangaku M, COVID-19 Task Force Committee of the Japanese Association of Dialysis Physicians, the Japanese Society for Dialysis Therapy, and the Japanese Society of Nephrology.
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Journal Title
Renal Replacement Therapy
Volume: 7
Pages: -
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] Nationwide survey of the coronavirus disease 2019 prevention and treatment systems for kidney disease patients: a study of Japanese Society of Nephrology-certified educational facilities2021
Author(s)
Sugawara Y, Iwagami M, Yoshida Y, Kikuchi K, Ando R, Shinoda T, Ryuzaki M, Nakamoto H, Sakai K, Hanafusa N, Kashihara N, Nangaku M, the COVID-19 Task Force Committee of the Japanese Association of Dialysis Physicians; the Japanese Society for Dialysis Therapy; and the Japanese Society of Nephrology
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Journal Title
Clinical and Experimental Nephrology
Volume: 25
Pages: 996-1002
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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