リアノジン受容体を標的とした小胞体Caリーク制御による新しい腎臓病治療法の開発

2021 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 21K08279
• Research Institution: Yamaguchi University
• Principal Investigator: 内海 仁志 山口大学, 大学院医学系研究科, 助教 (80815655)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 澁谷 正樹 山口大学, 大学院医学系研究科, 助教 (40865002)
• Project Period (FY): 2021-04-01 – 2024-03-31
• Keywords: 慢性腎臓病 / 小胞体ストレス / リアノジン受容体 / RyR安定化薬

Outline of Annual Research Achievements

小胞体(ER)は細胞内のタンパク質組み立て工場であり、細胞内カルシウム(Ca2+)制御は重要な役割を果たす。
細胞に過度のストレスがかかると、ER内で不良タンパク質が蓄積するERストレス状態となり細胞死を引き起こし、ERストレス病を発症する。
ERのCa2+放出チャネルであるリアノジン受容体（RyR2）の機能異常が、ERストレスを誘導し、慢性腎臓病(CKD)もERストレス病であり、RyR2の安定化がCKDの進展を抑制すると仮説を立てた。
リアノジン受容体（RyR2）構造安定化 {①薬理的介入：RyR安定化薬の慢性投与②遺伝的介入：RyR2遺伝子改変（RyR2-V3599Kノックイン→カルモジュリン（CaM）がRyR2に高親和性に結合)} による慢性腎臓病（CKD）の進展抑制を5/6腎臓摘出術（Nx）したマウスCKDモデルで検証した。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

(1) リアノジン受容体（RyR2）構造安定化 {①薬理的介入：RyR安定化薬の慢性投与　②遺伝的介入：RyR2遺伝子改変（RyR2-V3599Kノックイン→カルモジュリン（CaM）がRyR2に高親和性に結合)} による慢性腎臓病（CKD）の進展抑制を5/6腎臓摘出術（Nx）したマウスCKDモデルで検証し、in vivoでの検証が概ね予定通りに進行したため。

Strategy for Future Research Activity

野生型マウス（WT）とRyR2遺伝子改変マウス（V3599K）に、Nxをおこない、12週間観察した。Nx12週間後のWTでは、糸球体濾過量（GFR）は低下し糸球体が硬化した。しかし、薬理的介入（RyR安定化薬を慢性投与）したWTとRyR2遺伝子改変マウス（V3599K）のNx12週間後では、GFRの低下と糸球体の硬化が抑制されていた。RyR安定化薬の慢性投与/遺伝子改変によるRyR2構造安定化がCKDの進展を抑制することが示唆された。足細胞と尿細管細胞におけるERストレスとER Ca2+動態を検証し、RyR2構造安定化がCKDの進展を抑制する機序を解明する。

Causes of Carryover

顕微鏡の購入費用を他の研究予算から支出したため、次年度使用額が生じた。
次年度使用額は、ELISAキットや電顕の撮影費用に使用する計画である。