2023 Fiscal Year Annual Research Report
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21K08296
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| Research Institution | University of Toyama |
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Principal Investigator |
牧野 輝彦 富山大学, 学術研究部医学系, 准教授 (90359711)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
清水 忠道 富山大学, 学術研究部医学系, 教授 (70260396)
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| Project Period (FY) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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| Keywords | 表皮角化細胞 / フィラグリン / 細胞死 / DNA分解 / AIF / 有棘細胞癌 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
DNA分解におけるカルパイン1-AIF系の関与の解析
これまでの研究からFLGのN末端によるDNA分解とDNase1L2、DNase2、TREX2、CADとの関連がみられなかったため、AIFとの関連について解析した。分化を誘導したヒト表皮角化細胞（NHKs)を用いた免疫染色では核内にFLGのN末端とAIFが共局在し、その核がTUNEL陽性であった。AIFの発現を抑制した3次元培養皮膚では角層が形成されずAIFと核の消失との関係は確認できなかったが、表皮の組織構築にAIF関与している可能性が示唆された。さらにAIF抑制NHKsにproFLG-ABTを導入したところ対照群と比較し有意にTUNEL陽性細胞が減少していた。また、カルパイン1抑制NHKsにproFLG-ABTを導入したところ、AIFの核内移行が減少しTUNEL陽性細胞も有意に減少していた。以上よりFLGのN末端によるDNA分解にカルパイン1-AIF系が関与している可能性が示唆された。
proFLG-ABTとその関連分子による新規皮膚有棘細胞がん治療の探索
proFLG-ABTと核内で結合する可能性が示唆された蛋白質に対する抗体を用いて皮膚有棘細胞癌での発現を調べたところ、ERHが腫瘍細胞の核で強く発現していることが判明した。そこで皮膚有棘細胞癌の培養細胞であるHSC-1細胞を用いてがん細胞におけるERHの機能を解析した。siRNAでERHの発現を抑制するとHSC-1細胞の増殖が有意に抑制された。次にERH抑制HSC-1細胞を用いてMAPKシグナル経路、PI3K-AKTシグナル経路のリン酸化の変化をウェスタン解析で検討したが、ERK1/2、JNK、p38、AKTのリン酸化に対照群と明らかな変化はみられなかった。現在アポトーシスや細胞周期との関連について検討している。
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