2021 Fiscal Year Research-status Report
Establishment of psoriasis biomarkers using keratinocytes
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21K08334
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| Research Institution | Toho University |
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Principal Investigator |
石河 晃 東邦大学, 医学部, 教授 (10202988)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
橋本 由起 東邦大学, 医学部, 講師 (60439982)
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| Project Period (FY) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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| Keywords | 乾癬 / バイオマーカー |
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| Outline of Annual Research Achievements |
我々はこの研究開始までに乾癬患者からテープストリッピング法を用いて角質細胞を採取し、超音波破砕法を用いて蛋白を抽出し、ＥＬＩＳＡ法にてS100A8/A9を定量する方法を確立し乾癬の病勢を客観的に判断できるモニタリングバイオマーカーとして有力であることを明らかにした。今回の研究で我々は多数の乾癬患者に対し、1週単位で経時的に角質細胞S100A8/A9を測定し、治療変更に伴う病勢変化とS100A8/A9変化の時間的関係性、治療の種類による変化の違い、病型による変化の違いを明らかにすることにより、本方法の病勢モニタリングとしての鋭敏度を明らかにすると共に、治療反応性の予測マーカーとして機能できるか明らかにする。また、臨床応用可能な測定キットの開発に着手する。
東邦大学医療センター大森病院皮膚科を新規受診あるいは受診継続している乾癬患者（尋常性乾癬、乾癬性関節炎）を対象とし、患者同意取得後、被覆部（主に体幹や下腿）の病変部（皮疹部）及び健常部（無疹部）の2か所以上からテープストリッピング法にて角質細胞を採取した。また、同時に、患者の病勢評価としてPASI（Psoriasis Area and Severity Index）スコアを算出する。サンプルの採取は、新規治療の導入あるいは治療変更がなされた前後ではとくに短期間（1週間程度）での経過観察および測定を行い、PASIの変化との時間的関係を明らかにする。ストリッピングしたテープを細切りしたのち超音波破砕機にかけ、角質細胞から角質細胞中のタンパク質を抽出する。抽出液中の総タンパク質の量を定量、また、抽出液中のS100A8/S100A9複合体の量を ELISA を用いて定量する。角質細胞に含まれる総タンパク質１mg当たりに含まれるS100A8/A9の量を求める。
また、検査キットの作成可能性については企業との面談を行うこととした。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
今年度は東邦大学医療センター大森病院を受診した新規の乾癬患者に同意を得て、複数箇所からテープストリッピングを行い検体を採取し、部位別にS100A8/A9を測定し、その部位の病勢評価スコア(mPASI)との相関を検討した。また、治療経過中の変化を捉えるために同一患者を時系列でS100A8/A9を測定した。現在までに収集できた症例は100例を超えた。
また、キット化を目指して某企業とＷＥＢ面談を複数回行った。蛋白の定量を臨床現場で行うことができれば極めて有用性が高いことが理解された。半定量までは可能というところまでコンセンサスを得たが、現在まだオンサイトで定量できる具体的な方法は見つかっていない。
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| Strategy for Future Research Activity |
乾癬患者のリクルートを引き続き進め、検体採取を行う。ある程度の数が集まった時点で集計を行う。集計は時系列での変化、部位別での変化、PASIやmPASIなどの臨床的な病勢スコアとの相関、Ｓ100Ａ8/Ａ9の病勢予測マーカーとなり得るかどうかを検討する。また、引き続きこの方法の汎用性を高めるために超音波破砕器を使用しない蛋白抽出法を検討する。
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| Causes of Carryover |
物品費については消耗品費の購入が予定を下回ったため支出が抑えられた。旅費について海外の学会で研究成果を発表する予定にしていたが、コロナ禍で出張が困難となり取りやめたため、国内旅費のみの算定となった。
次年度は試薬等の消耗品の他、旅費および学会参加や論文投稿への費用に使用する予定である。
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Research Products
(1 results)
