膵癌個別化治療を目指したHOXB9によるEMT誘導と血管新生亢進について

2023 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 21K08694
• Research Institution: Tokyo Medical University
• Principal Investigator: 千葉 斉一 東京医科大学, 医学部, 准教授 (90348665)
• Project Period (FY): 2021-04-01 – 2024-03-31
• Keywords: HOXB9

Outline of Annual Research Achievements

HoxB9高発現膵癌細胞株（Panc1、MiaPaCa2）においてsiHoxB9によるHoxB9のノックダウンを確認し、さらには血管新生因子の抑制とTGFb signatureの抑制、さらにはEMTマーカーの変化を確認した。
そして、siHoxB9をHoxB9高発現膵癌細胞株に導入し細胞形態のMET様変化を確認したところ、siHOXB9導入により、E-Cadherinは上昇し、VimentineとFibronectinは増加傾向を示した。また、siHOXB9導入により、Migration/Invasion Assayにおける細胞浸潤能は低下を認め、そして遊走能の低下も同時に認めた。
さらなるメカニズムの詳細に解明するため、HoxB9高発現細胞株にTGFb抗体を添加し同様の変化が起こるかを検証した。その結果、siHOXB9によってMET様変化や低下した血管新生因子やTGFb signatureはTGFb抗体投与でも同様の結果を得られた。さらにはsiSmad4（TGFb経路下流の阻害作用を持つ）を導入し、同様の変化が起こることを検証したが、こちらは予想通りの結果は得られなかった。その原因については現在検証中である。
最後に、膵癌切除検体よりRNAを抽出し、得られたRNAからqrtPCR法を用いてHoxB9の発現量とEMTマーカーや血管新生因子、TGFｂ signatureの変化を検討したが、HOXB9高発現群では、EMTマーカーの変化や血管新生因子とTGFb signatureの増幅効果を認めた。