FusobacteriumによるNOD/NF-κBを介した食道癌進展機序の解明

2023 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 21K08714
• Research Institution: Kumamoto University
• Principal Investigator: 野元 大地 熊本大学, 大学院生命科学研究部(医), 特定研究員 (70895408)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 馬場 祥史 熊本大学, 病院, 特任准教授 (20599708) ; 岩槻 政晃 熊本大学, 大学院生命科学研究部(医), 助教 (50452777)
• Project Period (FY): 2021-04-01 – 2024-03-31
• Keywords: Fusobacterium nucleatum / Esophageal cancer / squamous cell carcinoma / NOD / NF-κB

Outline of Annual Research Achievements

①食道癌臨床検体を用いた実験、②In vitroにおける共培養実験、③In vivoモデルにおける検証の３つについて並行して研究を行った。最終年度は主に③について研究を中心に進めた。①食道扁平上皮癌切除検体を用いた免疫染色において、F. nucleatum陽性症例で陰性症例と比較しリン酸化NF-κB蛋白発現率が有意に高く、F. nucleatum陽性症例でのNF-κB活性化が示唆された。また、臨床での食道癌切除検体を用いてF. nucleatum陽性症例と陰性症例での臨床病理学的因子の違いを解析すると、腫瘍の深達度、リンパ節転移がF. nucleatum陽性症例で有意に進行していた。②NF-κB遺伝子をノックダウンしたヒト食道癌細胞株をF. nucleatumと共培養した上で、機能解析を行い、癌細胞の増殖能の変化を確認したところ、F. nucleatumによる癌細胞の増殖能亢進効果が抑制され、F. nucleatumがNF-κB活性化を介して癌細胞増殖能を亢進させていることが示唆された。③In vitroでの共培養実験で得られた結果について、生体内での検証を行うため、ヒト食道癌細胞株とF. nucleatumをヌードマウスに皮下移植するXenograft modelを作成し、腫瘍増殖能の変化、および腫瘍におけるNF-κB活性化やNOD発現について確認を行った。癌細胞株単独移植群と、癌細胞株とF. nucleatumの同時移植群を比較すると、同時移植群で腫瘍増殖能は有意に高く、NF-κBやNODの発現も上昇していた。