2021 Fiscal Year Research-status Report
p53ネットワーク破綻によるトランスクリプトーム情報を基盤とした食道癌治療戦略
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21K08801
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| Research Institution | Sapporo Medical University |
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Principal Investigator |
足立 靖 札幌医科大学, 医学部, 研究員 (10531189)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
佐々木 泰史 札幌医科大学, 医療人育成センター, 教授 (70322328)
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| Project Period (FY) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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| Keywords | 食道癌 / 扁平上皮癌 / p53 / 機能獲得変異 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
p53は、ヒト悪性新生物において最も高頻度に遺伝子変異が検出されているがん抑制遺伝子であるが、現時点で変異p53自体は治療標的とはなっておらず、臨床で使用できる分子標的薬は存在していない。本研究では、p53の変異を高頻度に認める食道扁平上皮癌に着目し、p53の機能獲得変異によって起こるトランスクリプトームの変動を効率的に分析し、その機能解析を行う。さらに発現異常、遺伝子変異の有無、悪性度および治療効果との関連性を解析することで、p53ネットワーク破綻のメカニズムを標的とした食道扁平上皮癌の治療法開発の基盤形成を目指している。
本研究の目的は、食道扁平上皮癌において、変異型p53の機能獲得変異によって変化するトランスクリプトームの全貌を解明し、p53ネットワークのさらなる理解につなげることである。さらに、変異型p53を標的とした治療法の開発につながる基礎研究を目指している。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
札幌医科大学病院及びその関連施設から、食道扁平上皮癌の凍結癌組織、非癌部組織、リンパ球の検体いただき、DNA、RNAを抽出した。今後、それらを用いて、p53の機能獲得変異によって起こるトランスクリプトームの変動を分析し、機能解析へと展開する予定である。
一方、食道におけるepidermization(表皮化)は白色扁平隆起として経験する。最近、我々はepidermizationを伴う高分化扁平上皮癌の非常に稀な一例を経験した。その癌はp53がびまん性に陽性であった。内視鏡的粘膜剥離術を行い病変組織を入手したので、その発癌機構の解析とp53ネットワークの解析を行う予定としている。次世代シーケンサーによる解析を進めるため、切除組織から遺伝子の抽出を行った。
GOF活性を評価するために、変異型p53発現プラスミドおよびアデノウイルスベクターを作成中である。
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| Strategy for Future Research Activity |
食道扁平上皮癌では、変異型p53の機能獲得変異のp63機能異常への寄与度は限定的と推察される。食道扁平上皮癌ではp53変異がほぼ必発し（かつ6割以上がミスセンス変異型）、複数カ所に認める症例も多いことから、未知の変異型p53の機能獲得変異の効果が存在する可能性がある。そこで変異型p53と発現が相関する遺伝子の網羅的解析に留まらず、これまで検討されていない機能獲得変異の機能に焦点を当てたRNA-seq解析を行う予定である。また、変異型p53を標的とした治療薬開発は遅れており、種々のミスセンス変異型p53と結合して機能を回復させる小分子化合物（PRIMA-1等）があるのみである。本研究では、変異型p53の機能獲得変異に関わるトランスクリプトームの解明を糸口に、p53変異を持つがんに対する新たな治療経路の同定を目指している。
DNA結合能、転写活性化能、および腫瘍原性解析から、機能獲得変異活性を評価した変異型p53発現プラスミド、またはアデノウイルスベクターを用い、変異型p53のGOFによって変化するトランスクリプトームを抽出する予定である。変異型p53の機能獲得変異によって発現が低下するトランスクリプトはがん抑制的に機能することが予想されるので、癌細胞株・組織における遺伝子異常を解析することとしている。さらに、発現誘導系、および発現抑制系を構築して、機能解析を行う予定である。特に細胞増殖、アポトーシス誘導能、細胞運動能、浸潤能への影響について詳細に検討することとしている。
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| Causes of Carryover |
先に記載したように、本研究の遂行が当初の予定からやや遅れているため、予算の執行が当初の計画より少なくなった。そのため、研究補助員に使用する予定であった、人件費・謝金の執行は行われなかった。また、新型コロナウイルスの影響で、学会がWebで行われることが多くなり、旅費の執行も行われなかった。
次年度は直接経費 1,100,000円、関節経費 330,000円、合計 1,430,000円の請求を行なっており、本研究を計画にしたがって遂行する予定である。次年度は、人件費・謝金および旅費の執行も計画に沿って行う予定である。なお、以上については、補助事業者である、佐々木泰史 札幌医科大学教授とも打ち合わせ済みである。
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Research Products
(2 results)
