Functional analysis of CD271 in cancer-associated fibroblasts of non-small cell lung cancer and its application to therapy

2023 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 21K08900
• Research Institution: Shiga University of Medical Science
• Principal Investigator: 片岡 瑛子 滋賀医科大学, 医学部, 助教 (00746919)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 寺本 晃治 滋賀医科大学, 医学部, 特任講師 (10452244) ; 大塩 恭彦 滋賀医科大学, 医学部, 講師 (60731916)
• Project Period (FY): 2021-04-01 – 2025-03-31
• Keywords: がん間質線維芽細胞 / CD271

Outline of Annual Research Achievements

非小細胞肺がんの手術組織標本を用いて、原発巣と縦隔リンパ節転移巣のがん間質線維芽細胞（Cancer-associated fibroblasts: CAF）におけるCD271の発現を免疫組織染色により検討した。原発巣と比較して縦隔リンパ節転移巣でCD271の発現割合や高発現症例数が増加し、術後再発、静脈浸潤、リンパ管浸潤、無再発生存率低下と有意な関連性を認めた。さらに、肺扁平上皮がん症例と比較して肺腺がん症例において、CD271の高発現症例が多く、低酸素領域と思われる瘢痕・壊死の周囲にCD271高発現のCAFを認めた。
In vitroの検討において、非小細胞肺がん細胞A549の培養上清およびレコンビナントのTGF-β1の添加により、CAFにおけるCD271の発現が増強することを確認した。さらに、A549の培養上清およびレコンビナントTGF-β1の添加により、CAFの遊走能・浸潤能は促進し、CD271阻害薬としてγ-secretase inhibitorを用いることで、促進した遊走能・浸潤能はいずれも抑制された。増殖能に関しては有意な変化はみられなかった。γ-secretaseは、CD271の細胞内ドメインを切断しリガンド非依存性にシグナルを活性化するため、CAFにおけるCD271の発現は、CD271の細胞内ドメインを介してリガンド非依存性に運動能に関与している可能性が考えられた。

Current Status of Research Progress

4: Progress in research has been delayed.

Reason

CAFと肺がん細胞との相互作用を介したCD271の機能を評価するにあたり、CAFにCD271をノックダウンする遺伝子導入実験が予定通り進んでおらず、本課題は遅れていると判断した。

Strategy for Future Research Activity

遺伝子導入でのCAFにおけるCD271の発現抑制が難しい場合は、CD271阻害薬を用いて、CAFにおけるCD271の発現が肺がん細胞に及ぼす影響やその機序に関してin vitroの検討で明らかにする。in vitroの結果をもとに、CD271がCAF阻害薬として抗腫瘍効果を得られるのか、in vivoでも検討していく。

Causes of Carryover

実験の遅れに伴い試薬や実験消耗品の物品費の使用が少なかったため、繰越金が生じた。次年度で行う実験の試薬や実験消耗品に使用する予定である。