2023 Fiscal Year Annual Research Report

Mechanisms of SOD3 in the shedding of procoagulant vesicles from human monocytes

Research Project

Project/Area Number	21K08939
Research Institution	National Center for Global Health and Medicine
Principal Investigator	西岡慧国立研究開発法人国立国際医療研究センター, その他部局等, 医師 (60755544)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	木村麻衣子国立研究開発法人国立国際医療研究センター, その他部局等, 医師 (50817301) 東俊晴国立研究開発法人国立国際医療研究センター, その他部局等, 医師 (60284197)
Project Period (FY)	2021-04-01 – 2024-03-31
Keywords	単球 / 組織因子 / アポトーシス / 凝固活性小胞 / スーパーオキシド
Outline of Annual Research Achievements	本研究課題は，ヒト単球の凝固活性小胞発生に対する細胞外スーパーオキシドジスムターゼ(SOD)の薬理作用の検討を目的として計画された．ヒト単球系細胞を血液製剤保存を模した低温環境に曝露し，正常体温まで復温するとアポトーシス細胞がならびにアポトーシス小胞が発生した．この実験系において低温曝露中に細胞浮遊液に活性酸素消去薬（SODやカタラーゼ）あるいはカルシウムキレート薬（クエン酸やEDTA）を加えたところ，カルシウムキレート薬はアポトーシス発生を強力に抑制したが，活性酸素消去薬はアポトーシス発生に対して無効であった．このとき細胞浮遊液上清を採取し，組織因子活性を測定したところ，低温曝露は上清中の組織因子活性を時間依存性に有意に増加した．この低温曝露によるヒト単球系細胞のTF放出に対してカルシウムキレート薬のみならずSODとカタラーゼが有意な抑制作用を示した．低温曝露中の細胞浮遊液上清中の組織因子活性は時間依存性に増加した一方，対照となる正常体温で加温された細胞浮遊液上清中の組織因子活性は細胞調整後1時間で最大となり，以後24時間の観察で増加しなかった．このことから組織因子は恒常的に産生され放出されるのではなく，なんらかの刺激に応じてヒト単球系細胞から放出されると考えられた．低温曝露中の細胞浮遊液上清中に累積した組織因子が，低温曝露による細胞障害によりヒト単球系細胞から漏出しているのかどうかを確認するため，24時間の低温曝露後に細胞洗浄を行い，1時間後と2時間後に細胞上清中の組織因子活性を測定した．洗浄2時間後の上清中の組織因子は1時間後の上清と同レベルであったため，組織因子は細胞浮遊液調整に際して細胞に加えられる刺激により細胞より放出されたものと考えられた．カタラーゼは組織因子放出を抑制しなかったが，SODとカルシウムキレート薬はこれを抑制した．