Exploration of the homeostatic mechanisms on the joint metabolism regulated via extracellular vesicles.

2022 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 21K09245
• Research Institution: Niigata University
• Principal Investigator: 目良 恒 新潟大学, 医歯学総合病院, 特任講師 (70650381)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 望月 友晴 新潟大学, 医歯学総合病院, 助教 (00773607) ; 谷藤 理 新潟大学, 医歯学総合病院, 講師 (30748348) ; 石橋 宰 大阪公立大学, 生命環境科学研究科, 准教授 (70293214)
• Project Period (FY): 2021-04-01 – 2024-03-31
• Keywords: 変形性膝関節症 / 関節内代謝 / 滑膜組織 / フローサイトメーター / RNA

Outline of Annual Research Achievements

昨年度採取した人工膝関節全置換術17例に今年度2例を対象として追加した。
合計19例の膝蓋下脂肪体および膝蓋上嚢の関節滑膜の細胞分析を行い、各症例のマクロファージ極性解析および間葉系細胞(MSC)の定量解析結果は得られている。関節滑膜のRNAおよび組織解析を進めている。組織解析については免疫組織染色による滑膜組織内の注目細胞および当該タンパクの空間的局在の検討が実験系の確立に難渋しているため、病理組織所見によるscore分類での評価に変更することを検討している。
臨床評価に関しては術前に加え術後1年の評価を加え、検討している。
これらの結果を踏まえ、17例の細胞を除去した関節液のRNA解析を行うため、検体は当施設の-80℃冷凍庫に保管されている。

Current Status of Research Progress

4: Progress in research has been delayed.

Reason

現在19症例の滑膜組織の細胞分析結果が得られ、同組織のRNAおよび組織解析を順次進めているが、昨年度からの解析の進捗は不十分である。また免疫組織染色による滑膜組織内の注目細胞および当該タンパクの空間的局在の実験系の確立に難渋している。さらに臨床評価との関連についての検討も不十分であり、進捗状況を以上のように評価した。

Strategy for Future Research Activity

引き続き、滑膜組織のRNA解析を進め、注目する遺伝子発現の定量化をおこない、これら解析結果に基き、注目する細胞に対して関連が示唆される発現遺伝子を3-5種類程度に絞り込む。さらに、免疫組織染色では、滑膜組織内における注目細胞および当該タンパクの空間的局在に関する実験が困難なため、病理組織所見によるscore分類に留める。以下、遺伝子解析に関しては、昨年同様に、絞り込んだ遺伝子の発現量の上位3例（高発現群）と下位3例（低発現群）を抽出し、関節液のRNA-seqによるmiRNAの2群間比較を行う。発現量に2倍以上の差のあるmiRNAを選別し、miRNAと滑膜組織中のmRNA発現量との症例間の相関を検討する。

Causes of Carryover

昨年度同様、コロナ禍にあり、分担研究者の学会参加費および交通費などの支出が少なかったことに加え、昨年以上に研究の進捗が遅滞したため、次年度使用額が生じた。これらの所要額は次年度に同目的もしくは試薬購入および外部委託費用として適正に使用する予定である。